11问答网
所有问题
当前搜索:
荧光原位杂交步骤
荧光原位杂交
(FISH)实验操作
步骤
答:
试验方法如下:1)
玻片处理(a)玻片清洗:热肥皂水刷洗,1%盐酸浸泡24h,再在0.1%焦炭酸二乙酯(DEPC)中浸泡24h
。(b)硅化处理:玻片和盖玻片1%(质量分数)盐酸煮沸10min,烘干,锡纸包好4℃保存备用。(c)明胶涂片制备:将烘干的玻片放入明胶中10min,然后60℃烘干过夜备用。(d)试剂瓶、塑料...
荧光原位杂交
(FISH)是什么,怎么做?
答:
将已变性或预退火的DNA探针10 μL 滴于已变性并脱水的玻片标本上,盖上18×18盖玻片,用Parafilm封片,置于潮湿暗盒中37℃
杂交
过夜(约15~17 h)。由于杂交液较少,而且杂交温度较高,持续时间又长,因此为了保持标本的湿润状态,此过程在湿盒中进行。4. 洗脱 此
步骤
有助于除去非特异性结合的探针...
原位杂交的
荧光原位杂交
答:
然后将探针直接杂交到染色体或DNA纤维切片上,再用与荧光素分子偶联的单克隆抗体与探针分子特异性结合来检测DNA序列在染色体或DNA纤维切片上的定性、定位、相对定量分析.FISH具有安全、快速、灵敏度高、探针能长期保存、能同时显示多种颜色等优点,不但能显示中期分裂相,还能显示于间期核.同时在
荧光原位杂交
...
流式
荧光原位杂交
?
答:
源于
荧光原位杂交
(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术,首先对寡核苷酸探针做特殊的修饰和标记, 然后用原位杂交法与靶染色体或DNA上特定的序列结合,再通过与荧光素分子相耦联的单克隆抗体来确定该DNA序列在染色体上的位置,最后结合流式细胞仪来检测。
荧光原位杂交
会用到哪些试剂?
答:
2. 试剂:- 指甲油 - 甲酰胺 - 氯化钠 - 柠檬酸钠 - 氢氧化钠 - 吐温20 - 20×SSC溶液 - 去离子甲酰胺(DF)- 70%甲酰胺/2×SSC溶液 - 50%甲酰胺/2×SSC溶液 - 50%硫酸葡聚糖(DS)-
杂交
液 - PI/antifade溶液 - DAPI/antifade溶液 - 封闭液I - 封闭液II -
荧光
检测试剂稀释...
什么是
荧光原位杂交
?有什么用?
答:
探针的
荧光
素标记可以采用直接和间接标记的方法。间接标记是采用生物素标记的dUTP(biotin-dUTP) 经过缺口平移法进行标记;而直接标记法是将荧光素直接与探针核苷酸的磷酸戊糖骨架共价结合,或在缺口平移法标记探针时将荧光素核苷三磷酸掺入。
原位杂交
术可在原位检测细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达,有很高...
如何设计特异性
荧光原位杂交
探针
答:
2.
原位杂交
相比免疫组化,定位相对准确,但如果蛋白在间质中发挥作用,原位杂交就检测不出来了,结合图像分析,原位杂交也可以对目的基因的转录半定量。3.首先是标本对照,这个包括阳性对照和阴性对照;第二个是探针对照,主要是明确探针的特异性;第三个是探针正义连阴性对照,第四个未标记探针竞争抑制;...
荧光原位杂交
技术的简介
答:
1969年,Gall和Pardue等首次将同位素探针用于
原位杂交
实验,获得成功。1987年,染色体原位抑制杂交法的创建,使FISH技术得以迅速发展。随后,Cremer等用生物素和汞或氨基乙酰
荧光
素等非放射性物质标记探针,创立了双色FISH技术。1990年,Nederlof等用3种荧光素成功探测出了3种以上的靶位DNA序列,从而宣告了多...
遗传学检测方法:
荧光原位杂交
(FISH)vs 微整列比较基因组杂交(aCGH)
答:
其过程独特而严谨:首先,样本通过精心制备,包括固定和预处理,然后进行
杂交
,如同拼图般匹配探针与特定序列;显色
步骤
犹如舞台灯光的聚焦,最后,通过
荧光
显微镜,我们得以窥见基因的细微变化。FISH的优势在于其高分辨率和多色标记,无论是染色体异常的检测、基因定位,还是染色体结构的研究,它都能游刃有余。
荧光原位杂交
会用到哪些试剂?
答:
(6)
杂交
液:8 μL体积分数25%DS,20 μL 20×SSC混合。(或40 μL体积分数50% DS,20 μL 20×SSC,40 μL ddH2O混合)取上述混合液50 μL,与5 μL DF混合即成。其终浓度为体积分数10% DS,2×SSC,体积分数50% DF。(7)PI/antifade溶液 PI原液:先以双蒸水配置溶液,浓度为...
1
2
3
4
5
6
7
8
9
涓嬩竴椤
其他人还搜
荧光原位杂交fish报告单
荧光原位杂交咋做的
荧光原位杂交检测什么的
荧光原位杂交检测怎么做
荧光原位杂交检测报告单
fish杂交液成分
荧光原位杂交有必要做吗
荧光原位杂交FISH技术难点
原位杂交是不是确诊癌了