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蛋白质还原烷基化
蛋白质还原烷基化
目的
答:
蛋白质还原烷基化
目的:证明发生紫色反应是蛋白质与双缩脲试剂产生的。在做蛋白质鉴定实验时,若选用大豆做材料,必须提前浸泡;若用蛋清作材料,必须稀释,防止其粘在试管壁上不易涮洗,在获得组织液后,应预留部分组织样液,与加入试剂的反应物颜色作对比。测定步骤 多肽链的拆分。由多条多肽链组成的...
蛋白还原烷基化
及酶解试剂添加顺序
答:
蛋白还原烷基化
及酶解试剂添加顺序先加双缩脲A两毫升,再加 3.4 滴双缩脲B。具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与cu2+反应,生成红紫色的络合物,所有的蛋白质均有此显色反应。蛋白还原原理:一价铜离子和独特的BCA溶液A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子...
2.
蛋白质
组学样品前处理(3)
答:
首先,我们来说说为什么步骤里要把丙酮沉淀放在
烷基化
以后。通过之前的学习,我们知道丙酮可以溶解样品的去污剂、
还原
剂等,而
蛋白
是不会在丙酮中溶解的,而是会沉淀下来,这样就达到了去除杂质的目的。 烷基化以后,球状蛋白变成链状,再通过丙酮沉淀去掉尿素或SDS等污染物,然后复溶(即重新溶解,以备下一步酶解操作),那么链...
蛋白质
组学中三次生物学重复只有一次鉴定到的蛋白要怎么处理
答:
整个过程可以分为以下流程:先从组织、体液或细胞中提取
蛋白质
,拿到蛋白混合溶液(根据你的研究目的,可以对蛋白先做分离,或者不分离),接下来
还原烷基化
(还原的过程是将蛋白的二硫键打开,然后烷基化可以修饰巯基,防止游离的巯基再生成二硫键)处理,并酶解成肽段。1,样品的收集与保存组织样品1)对...
2.
蛋白质
组学样品前处理(4)
答:
通过优化整个酶解系统,整个前处理过程2个小时之内就能完成,其中裂解与
还原烷基化
是同时完成的。完成之后通过一个自动化仪器,进入质谱,经过0.5小时的质谱实验,以及15分钟的结果分析,最后鉴定到了300多个常规的中高丰度
蛋白
(这个例子中没有对血液中的高丰度蛋白进行去除)。同样的,文章里也对这次实验...
蛋白
的氧化峰需要进行前处理才能出来吗
答:
要回答这个问题,首先需要理解样品前处理需要达到的目的:减少人为降解和修饰,并且尽量多的释放肽段。整个过程可以分为以下流程:先从组织、体液或细胞中提取
蛋白质
,拿到蛋白混合溶液(根据你的研究目的,可以对蛋白先做分离,或者不分离),接下来
还原烷基化
(还原的过程是将蛋白的二硫键打开,然后烷基化...
dtt能再次把
烷基化
化的多肽
蛋白还原
吗
答:
有
还原烷基化蛋白质
消化操作流程 1. 将所选择的胶点用1.5mm切胶笔切下,置于eppendorf (EP) 管或96孔PCR板 中,并记录点号及相应的位置;2. 加50μL DD.H2O 洗两次,10min/次;3. 加50 mM NH4HCO3/乙腈=1:1溶液50μL,超声脱色5min或37℃脱色20min,吸干;4. 重复步骤3,直至蓝色褪去...
甲醛消毒原理
答:
甲醛消毒原理:甲醛使得
蛋白质
凝固,
还原
氨基酸,使蛋白质分子
烷基化
,最终实现消毒的目的。甲醛熏蒸消毒目前已作为国内最为普遍的消毒、灭菌方法 ,使用效果还是比较显著的,不过它也有自身的弊端,甲醛有强烈的刺激性气味,消毒灭菌后去除残留气味时间长,对生产操作人员身体有害,有致癌作用。很多人使用时不...
2.
蛋白质
组学样品前处理(2)
答:
否则,如果样品中有污染,会给后续的实验带来很难解释的问题。 以上是针对不同样品的
蛋白
提取方法,下一篇将继续分享样品前处理的余下几步,即蛋白提取的质量控制、脱盐、
还原烷基化
和酶解。 已赞过 已踩过< 你对这个回答的评价是? 评论 收起 为你推荐:
蛋白质
一级结构的测定
答:
Cleland试剂首先与
蛋白质
-S-S-形成中间物,反应终了,还原剂被氧化形成一个稳定的六环化合物,蛋白质则被还原。
还原蛋白
不稳定,SH基极易氧化重新生成-S-S-键。稳定SH基的方法有:(A)
烷基化
试剂使SH基转变为稳定的硫醚衍生物。如果碘代乙酰胺代替碘代乙酸,其产物S羧氨甲基衍生物不带电荷,磺代...
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