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限制性
内切酶
是什么?
答:
当限制性
内切酶
的应用在上世纪七十年代流传开来的时候,以
NEB
为代表的许多公司开始寻找更多的限制性内切酶.除了某些病毒以外,限制性内切酶只在原核生物中被发现.人们正在从数以千计的细菌及古细菌中寻找新的限制性内切酶.而对已测序的原核基因组数据分析表明,限制性内切酶在原核生物中普遍存在--所有自由生存的细菌和古细...
限制性
内切酶
是什么?
答:
限制性核酸
内切酶
(restriction endonuclease):识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。[别名] Endodeoxyribonuclease[酶反应] 限制性内切酶能分裂DNA分子在一限定数目的专一部位上。它能识别外源DNA并将其降解。[单位定义] 在指明pH与37℃,在0.05mL反应混合物中,1小时消化1μg的λDNA的酶量为1单位。[性状] ...
关于PCR产物
酶切
答:
NEB
每一种酶都随酶提供相应的最佳NEBuffer,以保证100%的酶活性。NEBuffer的组成及
内切酶
在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液里的活性表》及每支酶的
说明书
。能在最大程度上保证两种酶活性的缓冲液即可用于双
酶切
。由于内切酶在非最佳缓冲液条件下的切割速率会减缓,因此使用时可根据每种酶在...
什么是限制性
内切酶
?
答:
两者的区别:限制性
内切酶
的主要功能是保护细菌不受噬菌体的感染,而外切酶其水解的最终产物是单个的核苷酸(DNA为dNMP,RNA为NMP)。核酸内切酶(endonuclease):在核酸水解酶中,为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶,与核酸外切酶相对应。外切酶:即核酸外切酶(exonuclease )核酸外切酶是一类能从...
最近做
酶切
连接,为防自连碱性磷酸酶将5‘端去磷酸化,可是T4连接酶怎么连...
答:
据
NEB
M0202 T4 DNA 连接
酶
的产品
说明
:该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑末端或粘性末端DNA之间的连接,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。也就是说载体切口两端4条链在碱性磷酸酶作用下均变成了羟基,而未被处理...
酶切
体系中各物质
neb 酶
缓冲液 buffer的作用?
答:
1.
NEB 酶
为限制性
内切酶
,对目的片段特异性序列进行识别与
酶切
;2.Buffer的作用是维持反应体系的酸碱度的稳定。
HindIII和EcoRI双
酶切
用
NEB
哪个缓冲液,还有BamHI 和HindIII双酶切用哪...
答:
推荐的是buffer 3.1,但是这个buffer这两个
酶
都没带,而且因为在3.1中貌似活性都只有50%左右,所以酶的用量得增加,而且时间得加长。如果实在不行,就分别切好了。网页上表格看得比较清楚(https://www.
neb
.com/tools-and-resources/interactive-tools/double-digest-finder?enzyme1={2F6573A8-32BE...
酶切
反应中添加酶的量应控制在什么范围内
答:
我用的是
NEB
的快切
酶
,一般5U/ul的酶,我切1.5-2ng的质粒加2.5ul的酶量,切一个小时左右就ok了。当然如果实在切不开。可以适当减少质粒量(我切的是50ul体系)。
核酸
内切酶
的简介
答:
首批被发现的限制性
内切酶
包括来源于大肠杆菌的EcoR I和EcoR II,以及来源于Heamophilus influenzae的Hind II和Hind III。这些酶可在特定位点切开DNA,将基因切割成小的基因片段。当限制性内切酶的应用在上世纪七十年代流传开来的时候,以
NEB
为代表的许多公司开始寻找更多的限制性内切酶。除了某些病毒以外,...
请问,
酶切
中的NEBuffers是什么意思?
答:
NEBuffers是
NEB
这个公司(New England Biolabs)生产的
酶
的缓冲液(buffer)。
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