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wb转膜时滤纸的作用
wb转膜时滤纸的作用
答:
滤纸为胶和膜提供平整的接触面,压力和通透性均一,有助于实验稳定真实
。海绵提供一定的弹性膨胀力,夹紧胶和膜,不会让样本逸出。
westernblot
转膜时
为什么要加
滤纸
和海绵
答:
支撑
作用
~确保膜和胶紧密结合~蛋白能稳定转移到膜上~
转膜
厚滤纸和薄
滤纸的
区别
答:
1、转膜厚滤纸质地均一,
可耐受甲醇、乙醇及其他有机试剂,厚度约0.6mm,可直接用于Western、Northern、Southern、EMSA等实验中蛋白或核酸的转印
,在制作转印三明治结构时厚滤纸可单独使用,只需要前后一张,形成三明治夹心结构。2、薄滤纸具有很好的湿强和很高的流速,经常用于过滤高粘度液体和乳液(例如甜果...
转膜时滤纸
什么样的都可以吗
答:
滤纸
越厚,电阻越大,因此电压增大,在恒流时,电压增大会使产热增多,滤纸没必要太厚,一二层就行;将膜放在胶上时,要注意赶走气泡,然后放上滤纸,再赶一次气泡,就行了。
转膜的时候滤纸
太厚会影响转膜吗
答:
影响。在
转膜的时候
,
滤纸
越厚,电阻就会越大,那么转膜的速度就会越慢,所以太厚会影响的。滤纸由棉质纤维组成,按不同
的用途
而使用不同的方法制作。
WESTERN BLOT实验中
转膜时滤纸
和膜的大小
有什么
要求?是滤纸比膜小对吧...
答:
1
滤纸
是上下都有的 之所以小一点儿 是怕上下的滤纸边缘直接短路,相连导致电子不能从胶穿过,这样不能达到很好的转移效率 2 可以用BSA,具体多大浓度,可以参照脱脂奶粉的 3 这个检测没多大用处吧 如果非要探讨这个问题 可以拿转完的胶再去染色(考马斯亮蓝或银染)4 显色系统 基本就是HRP催化的DAB...
WB转膜
后
滤纸
是不是可以回收利用的?两张滤纸接触会短路? 封闭过夜效果...
答:
转膜
用
滤纸
可以回收使用多次;两张滤纸如果是三明治两侧的,当然是不能接触,否则会短路;抗体好的话,室温封闭一个半小时足矣;抗体不好的话,过夜也不好;显影液避光保存的话,半年都没什么问题。
wb转膜
不放海绵
答:
wb转膜
放海绵。可以增加海绵的厚度,也可以多加两块海绵,但是多加
滤纸的时候
要小心,因为不同滤纸的质地和材质不一样,可能会导致电阻比较大,需要延长转膜时间才可以。
Western印迹法中电转移为什么裁剪的
滤纸
必须与凝胶大小完全一致?若不...
答:
没有听说过短路的问题,因为
滤纸
和凝胶都完全浸在缓冲液里面,缓冲液才是导电的关键介质.滤纸比凝胶大很多的情况我有多次经验,完全没有问题,结果同大小一致时没有区别.滤纸比凝胶小没有试过,有两个问题:一是凝胶不能很好地固定,超出滤纸边缘的部分得不到支撑 二是超出部分凝胶与硝酸纤维素膜不能...
转膜滤纸
可以吸水用吗
答:
可以。
转膜滤纸
是具有吸水效果的,可以用来吸水,但是比较浪费,因为转膜滤纸是一种常见于化学实验室的过滤工具,价格稍贵一点。
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