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western配胶有气泡结果
wb显影时膜下
有气泡
答:
western
blot显影的时候,如果背景比较高或者蛋白表达比较低会觉得背景不干净,好像是
有气泡
一样。解决办法:用方形的盒子,把膜放在里面,先用PBST漂洗3次(加入后晃一下就倒掉)。PBST洗5次(一抗,二抗后要洗7-10次),每次5分钟,在摇床上摇,速度越快越好(别当成摇细菌啊),以PBST不泼出来为...
请教各位!
western
blot
配胶
,积层胶干时为什么会
出现
大量
气泡
,有什么办 ...
答:
干时有?刚做好的时候没有吗?
可能是夹玻璃板的夹子松了
,换个试试。
Western
Blot条带呈皱眉状的原因及解决方法。
答:
Western
Blot条带呈皱眉状的原因:凝胶和玻璃挡板底部
有气泡
;两遍聚合不完全。其解决方法:电泳槽中加电泳液时排空玻璃挡板下方的气泡;
配胶
时充分混匀
Western
blot实验最常见的10个问题及解决方案
答:
一般是与转膜和显影的操作有关,转膜前尽量将膜平衡,并注意
胶
和膜之间避免
气泡
,显影时膜与X光片间也应避免气泡。6、存在散在小圆斑 是牛奶封闭液中的杂质颗粒导致,解决此类问题可提前配置好封闭液于4度保存,使用时勿混匀,仅用上层。7、
Western
Blot化学发光(ECL)淬灭的原因?Western Blot“淬灭”...
跑
western
blot时电泳时的条带呈斜行是咋回事
答:
2. 电泳凝胶中混入
气泡
,这可能使条带被挤压倾斜。3. 样品缓冲液存在干扰,这可能导致条带迁移率不统一。4. 上样量过大,被其他泳道挤压,这也可能使条带呈斜行。请注意,以上只是可能原因的一些基本解释,实际的原因可能更为复杂。如果您的实验
结果
不符合预期,建议您咨询专业的生物实验室专家或工程...
western
转膜不均匀什么原因
答:
孙启亮(站内联系TA)可能是因为你的三明治夹层
有气泡
,造成局部电阻过大所以没转过去porphybaby(站内联系TA)可能是 三明治 没夹好 松了 然后你的蛋白都飘散到转膜液里去了 如果是这样 你可以用 考马斯亮蓝去染一下转膜后的
胶
看看是否一边几乎没有条带 而另一边仍然有较多的条带如果是左右两边marker...
western
blot转膜时
气泡
没有赶净,膜上很多泡状影子,还能显影吗_百度知 ...
答:
能啊 只是如果
气泡
刚好在你目的条带的位置那你就悲剧了
western
blot 电泳时为什么会跑歪
答:
这个和你电泳的电压使用的很大的关系,刚上样的那会电压要小一点,一般90伏就行了,待样品完全进入分离胶就再加大电压,这样会使样品分离开来,但也不要太大,一般120伏到160伏之间,鉴于你电泳易跑歪,推荐你使用120伏电压吧。
western
blot转膜 膜上有白点点怎么回事
答:
封闭的时候才
出现
的白点,是不是奶粉没有完全溶解啊。重新溶解下奶粉,然后用0.45或者0.21um的滤膜过滤一下,看情形能不能好转。另外还得根据
结果
来看,如果白点最后显影都变成黑点,奶粉没有溶解的可能性就比较大了。
western
blot跑不出条带,是什么原因啊?
答:
转膜的问题,膜和
胶
之间
有气泡
等。
Western
blot法即是一种将电泳与KIJSA结合起来的技术,可分为电泳、转印、酶免疫测定3个阶段。Westernblot法结合了电泳的高分辨率和酶免疫测定的高敏感性和特异性,是一种能用于分析样本组分的免疫学测定方法。生物大分子印迹法实际上是凝胶电泳技术、固定化技术及分子亲和...
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