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紫外吸收法测定核酸含量实验报告
如何用
紫外吸收法测定
DNA
含量
?
答:
紫外吸收法测定
DNA
含量
,组成核酸分子的碱基,均具有一定的
吸收紫外
线特性,最大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的最大吸收波长是260nm,这个物理特性为
测定核酸
溶液
浓度
提供了基础。在波长260nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml;单链DNA或RNA为20μg/ml。可以次来计算核酸样品...
核酸含量
的
测定
紫外吸收法
的原理是什么?
答:
蛋白质也有
紫外吸收
,通常蛋白质的吸收高峰在280nm波长处,在260nm处的吸收值仅为
核酸
的1/10或更低,因此对于含有微量蛋白质的核酸样品,
测定
误差较小。若待测的核酸制品中混有大量的具有紫外吸收的杂质,则测定误差较大,应设法除去。不纯的样品不能用紫外吸收值作定量测定。从A260/ A280的比值可...
核酸
的
紫外
线
吸收
性质对实践有什么意义
答:
有强烈的吸收峰。用紫外光
吸收法测定
样品的
核酸含量
,具有简单、快速、灵敏度高的优点,并且待
测核酸
样品中含有的微量蛋白质和核苷酸等
吸收紫外
光物质,产生较小测定误差。
求助:检测纯度的
方法
拜托了各位 谢谢
视频时间 11:40
测定核酸含量
的
方法
有哪些?
答:
核酸含量
常用
紫外
分光光度法、定磷法、定糖法等进行
测定
。①定磷法 最常用钼蓝比色法来对磷进行测定。首先用浓硫酸或过氯酸将有机磷水解成无机磷。在酸性 条件下正磷酸与钼酸作用生成磷钼酸,在还原剂存在下被还原成钼蓝,其最大
吸收
峰在 660nm 处,在一定范围内溶液光密度与磷含量成正比,以此...
采用
紫外
光
吸收法测定
样品的
核酸含量
有何优缺点
答:
用紫外光
吸收法测定
样品的
核酸含量
,具有简单、快速、灵敏度高的优点,并且待
测核酸
样品中含有的微量蛋白质和核苷酸等
吸收紫外
光物质,产生较小测定误差。 但该法在测定样品内混杂有大量的上述吸收紫外光物质时,则会产生较大测定误差,需要设法事先除去。
紫外吸收法测定
蛋白质
含量
答:
样品中
核酸
对紫外光的吸收会影响蛋白质
浓度
的测定结果,但核酸的吸收高峰在260nm附近。纯蛋白质的A280与A260的光吸收比值约为1.8,而纯核酸的A280与A260光吸收比值约为0.5。通过测定A280与A260的值,利用经验公式或校正表能大致计算出不纯样品的蛋白质浓度。
紫外吸收法测定
蛋白质
含量
的优点:简便、...
干扰
紫外
线
吸收法测定核酸
的
含量实验
的物质有哪些,设计排除这些干扰的...
答:
最佳答案 所有对260nm附近波长的
紫外
线有显著吸收的物质都会干扰紫外线
吸收法测定核酸
的
含量实验
。实验中主要是蛋白质。用苯酚-氯仿-异丙醇法纯化核酸样品可以去除蛋白质。 本回答由提问者推荐 举报| 评论 0 0 叶绿蛋白 采纳率:77% 来自团队:生命科学 擅长: 生物学 化学 地球科学 海外地区 其他编程语言 其他...
采用
紫外
光
吸收法测定
样品的
核酸含量
,有何优点及缺点
答:
所有对260nm附近波长的
紫外
线有显著吸收的物质都会干扰紫外线
吸收法测定核酸
的
含量实验
。实验中主要是蛋白质。用苯酚-氯仿-异丙醇法纯化核酸样品可以去除蛋白质。
紫外吸收法测定
蛋白质
含量
时含有
核酸
类杂质应怎样校正?
答:
因为
核酸
在260nm处的光
吸收
比280nm更强,但蛋白质却恰恰相反,因此可利用280nm及260nm的吸收差来计算蛋白质的
含量
。常用下列经验公式计算:蛋白质
浓度
(mg/mL)=1.45A280-0.74A260 (A280和A260分别为蛋白质溶液在280nm和260nm处测得的吸光度值)还可以通过下述经验公式直接计算出溶液中的蛋白质的...
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