我不知道这是哪种提DNA的方法:加入250μLBufferTL,涡旋混匀,简短离心(3000g)之后90℃ 30min,以修复

甲醛变性的核酸,时间不可过长,小于1h。若Buffer TL出现沉淀,在温水中溶解后再使用。

2)室温静置2min。石蜡样品加如下处理:10000g离心2min,吸取石蜡块下液体和组织到一新的EP管。

3)加入20μL OB蛋白酶,颠倒混匀,简短离心,55℃2h。

4)10000g离心2min,吸取上清到一新的EP管。

5)加220μL Buffer BL,颠倒混匀,简短离心,70℃10min,简短离心。备注:玻片样本或者穿刺样本等材料很少的样本,加入BL的同时再加入4μL助沉剂。

6)加入250μL无水乙醇,颠倒充分混匀,简短离心。

7)转移混合液到DNA吸附柱中,放置2min,10000g30s,滤液重倒回柱中,10000g离心30s

加入500μlLHB
Buffer放置2min,10000g30s,弃去滤液,柱子重新套回收集管。

9)加入500μLWB Buffer,放置2min,10000g30s,弃去滤液,柱子重新套回收集管。使用前察看是否经过无水乙醇稀释。

10)重复步骤9,柱子套到新的收集管中。

10000g空转2min

11)将柱子装到新的无菌EP中,加入65~70℃预热的ElutimBuffer,静置3min以上,EB要在硅基质膜的中间悬空滴加,确保洗脱液能完全覆盖硅膜。

12)10000g4min。若DNA量少可进行二次洗脱,将前次洗脱下来的液体再上柱,离心,以提高产量。

注:提取过程尽量轻柔,操作过程尽量简化,减少DNA的降解提取的DNA4度保存。-20℃保存禁止反复冻融造成降解。

第1个回答  2013-05-12
这是利用PCR技术扩增目的基因。
PCR即多聚酶链式反应。追问

这我也知道,我是问这个采用的是哪种提DNA的方法,比如酚氯仿法啊,之类的

追答

真抱歉,现在所学的知识没有那么深,不能够帮上您、

第2个回答  2019-03-29
碱裂解法提取质粒DNA
第3个回答  2013-05-07
打算该大厦阿古斯萨嘎大噶撒
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