涂板之前用kan的LB摇菌怎么办

如题所述

第1个回答  2022-10-01
实验步骤

1. LB 培养基Tryptone10 gYeast Extract5 gNaCl10 g加水至 1000 mL(pH 7.2,固体培养基加 1.8% 琼脂粉)。

2. LB 抗性筛选培养基待灭菌后的 LB 固体培养基温度降至 50℃左右,加入抗生素储存液至终浓度 50 µg/mL,即每毫升培养基加抗生素储存液 1 µL,摇匀后,倒平板。液体 LB 抗性筛选培养基,在完全冷却后加入抗生素,加入的量与固体培养基相同。

3. LB/Amp/IPTG/X-gal 培养基在含 100 µg/mL Amp 的 LB 琼脂平板上加入 40 µL X-gal 贮存液和 40 µL IPTG 溶液,用无菌玻璃涂布器把溶液均匀涂布于整个平板表面,超净工作台上吹干后备用。

4. SOC 液体培养基Tryptone20 gYeast Extract5 gNaCl0.5 g加入 950 mL 水,完全溶解后加入 250 mmol/L 的 KCl 溶液。