folin-酚法测定蛋白酶活力

folin-酚法原理是多肽中的肽键在碱性条件下,与酒石酸钾钠铜盐溶液起作用,生成紫红色络合物。乙试剂是由磷钼酸、磷钨酸、硫酸和溴等组成。此试剂在碱性条件下,易被多肽中酪氨酸的酚基还原呈蓝色反应,其色泽深浅与多肽含量成正比。
蛋白质可以与folin-酚试剂显色,但是蛋白酶是将蛋白质水解成多肽或氨基酸,此时如果测定蛋白酶对酪素的水解活力时,水解产生含有酪氨酸的多肽或者酪氨酸也可与folin-酚试剂显色,这时候不是就影响了么?

第1个回答  2011-03-19
先制作酪氨酸标准曲线
folin-酚甲液可以不用,自己配Na2CO3 再加乙也1ml,具体做法有参考文献 :产芽抱梭菌纤溶酶的纯化及特性本回答被网友采纳
第2个回答  2011-03-17
我认为是,福林酚试剂的显色反应,就是由酪氨酸、还有色氨酸、半胱氨酸引起的;测定酶的水解活性,当酪氨酸含量越多,即颜色越深,说明蛋白质被水解程度越高,所以蛋白酶水解活性越强的~~