那么细胞系的建立的主要试剂需要些什么?一些传代培养的又需要些什么?
追答细胞建系的话,就涉及到采样的问题,为了避免污染的发生,在采样的源头就树立无菌概念很重要。采样时尽可能做到无菌,当然有时限于现场条件无法做到无菌采样,但也需要尽可能的做到干净。
采样时需要的主要试剂包括:组织表面消毒用试剂(常用酒精),组织采集后保存试剂(常用含2-5倍双抗的培养基或PBS),组织样品采集后,需要低温保存运输,在尽可能短的时间内拿到实验室进行下一步处理。
原代细胞系的建立常采用组织贴块培养法,或是胰蛋白酶消化法。
细胞传代培养用到的试剂基本三样:细胞传代前清洗细胞表面的PBS,细胞消化用的酶(胰蛋白酶或胶原蛋白酶等),完全培养基(含血清,抗生素,细胞培养添加物等)。