谁可以简单罗列下做OVERLAP PCR的要点吗？ 最好图解原理 以及引物设计时候注意事项 谢谢

Question

如题所述

Answer 1

其实就是PCR,做两次,把两段序列融合在一起,第一次PCR的时候,第一段序列的3'引物和第二段序列的5'引物要有一段互补区,然后用第一次PCR的产物做模板,第一段序列的5'引物和第二段序列的3'引物做引物,进行第二次扩增,形成融合序列,详见图示

 

追问

请问在做OVERLAP的时候要注意什么吗
我P出了两个目的条带 然后就等比混合在一起做PCR就可以了吗

追答

PCR的片度做个胶回收吧，然后再等比例混合，其它也没什么需要特别注意的，跟普通PCR一样

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