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洋桔梗农杆菌转化法
农杆菌转化法
的过程
答:
农杆菌转化法的过程如下:
转化:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上--进入农杆菌--导入植物细胞--目的基因整合到植物染色体的DNA上--目的基因得以稳定维持和表达
。1、获取目的基因:用限制性核酸内切酶切割下目的基因。2、基因表达载体的构建:将目的基因与载体(大多数选用质粒)用DNA连接酶连接起来。3、将目的基因...
农杆菌转化法
的原理是什么?
答:
农杆菌转化法的原理是构建双元表达载体系统
,由两种质粒组成,一种是位于大肠杆菌中的穿梭质粒,另一种是位于农杆菌中的辅助性质粒。将重组质粒电转化到农杆菌感受态细胞中后,用含有重组质粒的农杆菌去侵染植物根部切口,通过辅助性质粒的Vir区表达蛋白与重组质粒T-DNA区的反式作用激活T-DNA的转移,从而...
农杆菌转化
实验步骤
答:
4.植株转化实验:农杆菌与植物细胞的共培养,在溶液中加入促进植株愈伤生长的激素能一定程度提高转化率
。转化细胞的筛选,大多是利用抗生素进行筛选的,抗生素的选择则需根据目的载体确定。同时进行利用抗生素完成脱菌的过程。也有的资料提供的是感染植株,也就是农杆菌直接去感染植物。5.最后将成功表达的细...
农杆菌转化法
详细过程
答:
农杆菌转化法详细过程如下:
1、获得目的基因:用限制性内切酶切割目的基因
。基因工程示意图。2、基因表达载体的构建:目的基因与载体(多为质粒)通过DNA连接酶连接。3、将目的基因导入受体细胞:将含有目的基因的重组质粒导入根癌农杆菌(根癌农杆菌为受体细胞)。4、目的基因的检测和鉴定:DNA分子杂交/分...
农杆菌转化法
的步骤
答:
1、
农杆菌
培养至适当浓度。2、受体材料消毒处理并切成适当大小组织块。3、组织块浸泡于菌液中适当的时间。4、浸泡过的组织块放于共培养基上培养。5、组织块转移到筛选培养基上培养,选出阳性幼苗。检测
方法
根据实验目的不同而不同。可以用PCR扩增目的片段;如果有报告基因GUS、GFP等也可以进行染色或荧光...
农杆菌转化法
(Insertional mutagenesis via Agrobacterium mediate...
答:
农杆菌转化法
,一种精密的遗传工程工具,其核心原理在于将特异设计的T-DNA(转移DNA)搭载农杆菌,与目标细胞,如植物细胞,进行一场微妙的细胞间对话。通过共孵育,农杆菌的T-DNA犹如携带秘密遗传信息的信使,悄然而精准地融入目标细胞的基因组中。转化过程的精密序列</ 这一过程可分为八个关键步骤:...
农杆菌转换法
是什么
答:
农杆菌转化法
是将目的基因导入植物细胞采用最多的方法。农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物,而对大多数单子叶植物没有感染能力。当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌移向这些细胞,这时农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA(可转移的...
农杆菌
介导
转化法
导转化法
答:
农杆菌
介导
转化法
是一种科学手段,利用农杆菌的特性将外源基因导入到植物基因组中,以创造转基因作物。这种转化过程主要分为两个步骤:首先,农杆菌在细胞内通过特定酶的作用,将Ti质粒上的T-DNA切割为单链,并与一系列Vir蛋白结合。这些Vir蛋白,如VirE2,扮演着关键角色。接下来,VirE2蛋白上携带有核...
如何将外源基因导入植物细胞并表达
答:
2.基因枪介导
转化法
利用火药*或高压气体加速(这一加速设备被称为基因枪),将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中,然后通过细胞和组织培养技术,再生出植株,选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。与
农杆菌转化
相比,基因枪
法转化
的一个主要优点是不受受体植物范围...
农杆菌转化法
作用
答:
尤其是当它整合到受体细胞的染色体DNA上时。科学家们巧妙地利用了
农杆菌
的这一特性,将目的基因插入Ti质粒的T-DNA部分。通过农杆菌的
转化
作用,目的基因得以进入植物细胞,成为其染色体DNA的一部分,从而实现基因的稳定维持和表达。这种
方法
因其广泛的应用,成为将基因导入植物细胞的主要途径之一。
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