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病毒纯化步骤
绿豆黄花叶
病毒
病的病毒提纯方法是什么?
答:
通过在PEG中反向不连续溶解梯度的方法进行层析,然后15000r/min离心30min。提出
病毒
的沉淀带,并通过高速离心进行浓缩,最后通过蔗糖密度梯度离心
纯化
,获得提纯病毒粒子。病毒产量为1mg/kg叶片。
关于
病毒纯化
答:
病毒纯化方法
1. 超过滤法: 利用超滤膜将水、盐和小分子滤除
,将大分子或病毒等颗粒截留,从而达到纯化的目的,该方法主要用于大容量病毒样品的浓缩,且回收率高。常用的超滤膜是硝酸纤维素滤膜。注意:超滤膜孔径一定要比病毒颗粒小,且只能去除比病毒小的细胞碎块 2. 吸附法: 利用病毒颗粒或杂质的...
番茄环斑病
病毒
的提纯的方法是什么?
答:
因
病毒
很不稳定,许多常规的
纯化
方法都无效。下列两种方法似乎还令人满意。(1)Gooding(1963)法。冰冻感病的菜豆叶和茎秆,每100g用50ml含0.75g抗坏血酸钠的蒸馏水,捣成匀浆,纱布过滤,加正丁醇至8.5%(V/V),低速离心。高速、低速离心反复4次,把高速得到的沉淀再悬浮于0.02mol/L磷酸缓冲...
梨环斑
病毒
病的理化性质是什么?
答:
提取液加20%氯仿搅拌30min,4℃下10000r/min离心10min,悬浮液再4℃下110000r/min离心180min,沉淀悬浮于0.05mol/L(pH7.5)磷酸缓冲液中,再进行几次差速离心,使
病毒
进一步
纯化
。
烟草坏死
病毒
病病原的名称和病毒提纯方式有哪些?
答:
病毒提纯:将冷冻的叶片或已冷冻的叶片浆液解冻,然后加水后研磨
。液体中加入硫铵(0.25g/ml)进行澄清,澄清液经低速离心沉淀病毒粒子。将沉淀物再溶于足量的水中,经过超速离心沉淀病毒粒子,然后在悬浮在水中,此过程一般进行3次。沉淀的病毒粒子可以再经过蔗糖密度梯度离心做进一步纯化。方法可以用于对...
朱槿黄花叶
病毒
病的病原特性是什么?
答:
病毒从水相中沉淀,沉淀悬浮于0.02mol/L(pH6.0)醋酸钠缓冲液中,再经多次差速离心,最后,60000r/min,120min,10%~40%蔗糖(0.1mol/L磷酸盐-硼酸盐缓冲液配制)密度梯度离心,
纯化病毒
成单一的乳白色带。病毒粒子:直杆状,300nm×18nm。沉降系数为196S,扩散系数1.29g/cm3。
如何获得某一细菌的纯培养(或
病毒
的纯培养)?简述整个
过程
。
答:
先对分泌物进行第一次培养后,挑出其中的可疑菌落,一环就够了,然后接种到一个新的培养基再培养,这就是细菌的分离
纯化过程
,也就是纯培养,整个过程一定要注意无菌操作,挑选可以菌落时,一定要注意和杂菌区分。很多细菌无法培养。能培养的细菌需要去查它的培养基配方,和培养时的条件。
病毒
一般是作为...
朱槿褪绿环斑
病毒
病病原特性是什么?
答:
沉淀悬浮于0.02mol/L(pH6.0)醋酸钠缓冲液中,再经多次差速离心,最后,60000r/min,离心120min,10%~40%蔗糖(0.1mol/L磷酸盐-硼酸盐缓冲液配制)密度梯度离心,
纯化病毒
成单一的乳白色带。病毒理化特性:①病毒粒子。球状,直径28nm。沉降系数118S。扩散系数1.35g/cm3。A260/A280为1.49。
甘蔗裴济
病毒
病的理化性质是什么?
答:
病毒
提纯:Kiratiya-angel et al.(1987)的提纯
步骤
:取甘蔗病叶上的脉肿,加0.1mol/L(pH8.5)甘氨酸(含0.01EDTA)(按1粒脉肿加1ml缓冲液),低速离心澄清提取液,加0.25%戊二醛固定病毒粒子,经10%蔗糖垫离心使病毒与寄主组织分离,再经氯化铯梯度离心进一步
纯化
。病毒理化特性:①病毒粒子...
玉米褪绿矮缩
病毒
病的理化性质是什么?
答:
病毒
提纯:在含有0.5%2-巯基乙醇的0.1mol/L或0.5mol/L(pH7)磷酸钾缓冲液中将发病的玉米组织匀浆(2ml缓冲液/g组织)。用纱布包裹并用力挤压出汁液,然后加入氯仿(1/3~1/2体积)乳化使其澄清。回收水相,并采用下述方法之一加以
纯化
:①将澄清的提纯液离心(100000g,1h)。将沉淀在0.1mol...
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