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简述pcr的注意事项
pcr
实验中
的注意事项
答:
pcr实验中的注意事项如下:
1、电子称的使用,要时刻注意保持电子称的精确性,保持清洁,根据不同的浓度的胶称琼脂糖
。2、加TAE(化学试剂)的量要适当,以免配出来的胶太薄导致胶孔太浅或浓度太低。3、
倒胶前胶托一定要洗干净,并擦干
;倒胶时要待胶冷到一定温度摇匀尽量不要产生气泡。若胶液的温...
pcr
需要
注意
的问题
答:
所用离心管及样进枪头等均应一次性使用。必要时,在加标本前,反应管和试剂用紫外线照射,以破坏存在的核酸
。二是空气中的小片段核酸污染,这些小片段比靶序列短,但有一定的同源性。可互相拼接,与引物互补后,可扩增出PCR产物,而导致假阳性的产生,可用巢式PCR方法来减轻或消除。4、出现非特异性...
PCR
实验操作
注意事项
有哪些
答:
1、必须在无菌无尘环境下进行操作
;2、检测人员必须
通过国家临检中心业务培训并取得合格证书
;3、
必须拥有标准的的PCR荧光实验室
;4、后PCR区PCR完成以后,应该留出一个专门用于反应后处理样品的地方。
PCR
实验操作
注意事项
有哪些
答:
5、
必须在无菌无尘环境下进行操作
PCR实验室必须建立严格的实验室管理制度、建立标准化操作程序(SOP)、建立系列质量管理文件等,确保实验室日常运行符合国家卫生部的要求,确保检测结果准确、确保实验室卫生安全,确保实验室长期稳定运行。
荧光定量
PCR的注意事项
,了解一下?
答:
1.按照正确的开关机顺序操作,有助于延长仪器的使用寿命,减少仪器出故障的频率.开机顺序:先开电脑
,待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机,等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件,进行实验.关机顺序:确认实验已经结束后,首先关闭信号收集软件,然后关掉定量PCR仪主机的电源,最后关闭电脑.2.应该...
RT -
PCR注意事项
答:
在进行RT-
PCR
实验时,首要关注的是保护RNA的稳定性。在提取总RNA的过程中,务必谨慎操作,避免mRNA断裂,确保RNA的完整性。为了确保实验的准确性,阴性对照的设置至关重要。它能帮助排除非特异性扩增的干扰,确保实验结果的可靠性。内参的选择和使用是为了精确定量目标RNA。常见的内参如G3PD和β-Actin等...
pcr
及凝胶成像系统使用
注意事项
答:
PCR
:1,加样准确;2,不要交叉污染;3,酶要低温保存,最好冰上操作;4,管盖要盖紧,防止挥发 凝胶成像:1,如果是EB染料,要
注意
人身安全,分清污染区和非污染区;花青类染料不此问题。2,如果是紫外发光,要注意紫外线防护,保护眼睛;可见光成像则无此问题。3,如需切胶回收,注意避免长时间...
干货分享 | Real-time
PCR
(
注意事项
、常见问题)下
答:
注意事项
在进行实时
PCR
实验时,需注意以下几点:首先,提RNA所用的枪头、器皿等耗材通常为商家处理好的成品,但在特殊情况下,实验者需用DEPC处理这些耗材。此外,市面上存在RNA酶清除试剂,能有效减少RNA降解。然而,清洗RNA沉淀所用的酒精需用DEPC处理后的水配制。其次,RT-PCR检测引物长度应控制在100...
RT -
PCR的注意事项
答:
1. 在实验过程中要防止RNA的降解,保持RNA的完整性。在总RNA的提取过程中,
注意
避免mRNA的断裂。2. 为了防止非特异性扩增,必须设阴性对照。3. 内参的设定:主要为了用于靶RNA的定量。常用的内参有G3PD(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)、β-Actin(β-肌动蛋白)等。其目的在于避免RNA定量误差、加样...
RT-
PCR的注意事项
是什么?
答:
多和大家讨论,同时多关注别人讨论的经验,这几乎是最快提高的捷径了 所有的试剂都自己配,出了问题才好找原因 防止RNA酶污染的措施 1.所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr或更长时间.2.塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用氯仿冲洗(
注意
:有机玻璃器具因可被氯仿腐蚀,故不能使用).3....
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