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核酸的复性及影响因素
核酸的
物理性质容易受哪些
因素影响
?
答:
核酸本质是蛋白质,任何可以影响蛋白质变性的因素都可以
影响核酸
.有化学因素,物理
因素和
生物因素.如果从微观考虑,则要从
核酸的
合成考虑起.
PCR技术中
复性
温度大小与哪些
因素
有关
答:
复性的温度与引物有关系。1、复性温度决定着PCR的特异性。温度越低复性越好,但是容易出现引物与靶DNA的错配,增加非特异性结合,温度太高不利于复性。2、确定了复性温度后,复性时间并不是关键
因素
。但复性时间太长会增加非特异
的复性
。
作为遗传物质的DNA具有哪些特征
以及
DNA
复性
必须满足的条件
答:
DNA
的复性
,也叫退火。与DNA的浓度,溶液的温度和离子强度有关。DNA的复性速度受多种
因素的影响
。一般复杂的DNA序列比简单的序列复性的时间更长,大的DNA片段比小的DNA片段复性花的时间长。。此外,温度也是一个因素,低温减少分子碰撞的机会,所以复性温度不宜过低,一般比熔点低20到25度比较合适。离子...
分子杂交与哪个
核酸
理化性质有关
答:
核酸分子杂交主要运用了
核酸的
变性、碱基配对、复性的理化性质。核酸分子杂交的原理:具有互补序列的两条单链核酸分子在一定的条件下(适宜的温度及离子强度等)碱基互补配对结合,重新形成双链;在这一过程中,核酸分子经历了变性
和复性
的变化,以及在复性过程中个分子间键的形成和断裂。杂交的双方是待测...
核酸的
相关分类
答:
分子末端以及内部更为活跃的富含A-T的区域的变性将会使其赴京的螺旋变得不稳定,从而导致整个分子结构在解链温度下共同变性。② 复性:DNA的热变性可通过冷却溶液的方法复原。不同
核酸
链之间的互补部分
的复性
称为杂交。 一般来说,进化程度高的生物DNA分子应越大,能贮存更多遗传信息。但进化的复杂程度与DNA大小并不...
核酸
杂交的原理
答:
其原理是
核酸
变性
和复性
理论。即双链的核酸分子在某些理化
因素
作用下双链解开,而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双边结构。杂交通常在一支持膜上进行,因此又称为核酸印迹杂交。根据检测样品的不同又被分为DNA印迹交(Southern blot hybridization )和RNA印迹杂交(Northern blot hybridization)。
[经典文献速读] 核糖
核酸
酶的变性
和
自
复性
答:
图1清晰地说明了核糖
核酸
酶(Ribonuclease, RNase)的变性和自
复性
的过程:A是RNase的native状态,即具有三级结构,B是经过8 mol/L 尿素处理的变性RNase,是氨基酸链,不具有三级结构,而C属于是重氧化处理后的变性RNase,为中间态。这是克里斯蒂安·B·安芬森(Christian B. Anfinsen)组的实验流程和结果...
Tm值的
影响
Tm值
的因素
答:
Tm值的
影响因素
如下:(1)G—C的含量:在一定条件下Tm高低由DNA分子中的G-C含量所决定。G-C含量高时,Tm值比较高,反之则低。这是因为G-C之间的氢键较A-T多,解链时需要较多的能量之故。Tm值和G-C的含量可用二一个经验公式表示:(G—C)%=(Tm-69.3)×2.44 在一定条件下(pH7.0,...
什么叫
核酸
杂交?有何应用价值?
答:
核酸
杂交是从核酸分子混合液中检测特定大小的核酸分子的传统方法。其原理是核酸变性
和复性
理论。即双链的核酸分子在某些理化
因素
作用下双链解开,而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双边结构。杂交通常在一支持膜上进行,因此又称为核酸印迹杂交。根据检测样品的不同又被分为DNA印迹交(Southern blot ...
论述
核酸
与蛋白质变性的机制
及其
在生命活动中的重要意义
答:
但肽键不受
影响
,一级结构仍保持完整,酶变性失去活性。如用透析方法除去尿素和β-巯基乙醇后,核糖
核酸
酶又从无序的多肽链卷曲折叠成天然酶的空间结构,酶从变性状态
复性
,酶的活性又恢复至原来水平(图1-17B见六版教材图1-17)。这充分证明,只要其一级结构未被破坏,就可能恢复原来的三级结构,功能依然存在,所以多...
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