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核酸的复性及影响因素
生物化学 什么是dna变性
和复性
答:
3.DNA复性的实际应用——杂交:通过变性DNA
的复性
性质,我们可知道,DNA单链之间、RNA单链之间、一条DNA和一条RNA链之间只要存在序列互补配对区域,不管是整条链互补,还是部分序列互补,即可重新形成整条双链或部分双链,这即为
核酸
分子杂交,这在分子生物学研究中有极大的应用,比如:可用于在基因组中对特异...
DNA
复性
的DNA顺序的复杂性
答:
在
核酸复性
研究中,定义了一个Cot的术语,(Co为单链DNA的起始浓度,t是以秒为单位的时间),用以表示复性速度与DNA 顺序复杂性的关系。在探讨DNA顺序对复性速度的影响时,将温度、溶剂离子强度、核酸片段大小等其它
影响因素
均予以固定,以不同程度的核酸分子重缔合部分(在时间t时
的复性
率)取对数后对...
怎么制备植物Cot1 DNA
答:
在
核酸复性
研究中,定义了一个Cot的术语,(Co为单链DNA的起始浓度,t是以秒为单位的时间),用以表示复性速度与DNA 顺序复杂性的关系。在探讨DNA顺序对复性速度的影响时,将温度、溶剂离子强度、核酸片段大小等其它
影响因素
均予以固定,以不同程度的核酸分子重缔合部分(在时间t时
的复性
率)取对数后对...
58.热变性的DNA分子,在适当条件下可以
复性
,条件之一是
答:
DNA
的复性
指变性DNA 在适当条件下,二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象,它是变性的一种逆转过程。热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性,此过程称之为" 退火"(annealing)。这一术语也用以描述杂交
核酸
分子的形成(见后)。DNA的复性不仅受温度影响,还受DNA自身特性等其它
因素的影响
。
DNA
复性
的温度和时间
答:
在很低的温度(如4℃以下)下,分子的热运动显著减弱互补链结合的机会自然大大减少。从热运动的角度考虑,维持在Tm以下较高温度,更有利于
复性
。复性时温度下降必须是一缓慢过程,若在超过Tm的温度下迅速冷却至低温(如4℃以下),复性几乎是及不可能的,
核酸
实验中经常以此方式保持DNA的变性(单链)...
核酸的
组成元素
答:
变性作用是指
核酸
双螺旋结构被破坏,双链解开,但共价键并未断裂.引起变性
的因素
很多,升高温度、过酸、过碱、纯水以及加入变性剂等都能造成核酸变性.核酸变性时,物理化学性质将发生改变,表现出增色效应.热变性一半时的温度称为熔点或变性温度,以Tm来表示.DNA的G+C含量
影响
Tm值.由于G≡C比A=T碱基对更...
碱裂解法提取质粒DNA中哪些
因素影响核酸的
沉淀?
答:
碱裂解法提取质粒DNA中温度和湿度会
影响核酸的
沉淀。碱裂解法提取质粒dna中高PH的溶液会使细胞壁粕类从而使得DNA和蛋白质变性。细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中,会使细胞壁破裂,染色体DNA和蛋白质变性,将质粒DNA释放到上清中。碱裂解法的原理:当菌体在NaOH 和SDS 溶液中裂解时,蛋白质与...
核酸
提取过程中,哪些
因素
会
影响
答:
1.固定剂对DNA的影响固定剂的类型直接影响提取DNA的质量.2.固定时间对DNA的影响固定过程中所发生的组织反应至今尚未被完全理解,虽然理论上讲室温下福尔马林与DNA几乎不发生的,但已发现碱基与组蛋白之间的甲基交联.3.固定温度等其他
因素
对DNA
的影响核酸
与固定剂的反应由反应成分、浓度、酸硷度以及温度等...
用琼脂糖凝胶电泳分析
核酸
(DNA和RNA)有哪些
影响因素
?
答:
核酸
分子是两性解离分子,在高于其等电点的电泳缓冲液中,其碱基不解离,而磷酸基团全部解离,核酸分子因而带负电荷,电泳时向正极迁移。琼脂糖主要从海洋植物琼脂中提取而来并经糖基化修饰,为一种聚合链线性分子,使用琼脂糖凝胶作为电泳支持介质,发挥分子筛功能,使得大小和构象不同的核酸分子的迁移率...
碱裂解法提取质粒DNA中哪些
因素影响核酸的
沉淀?
答:
碱裂解法提取质粒DNA中温度和湿度会
影响核酸的
沉淀。碱裂解法提取质粒dna中高PH的溶液会使细胞壁粕类从而使得DNA和蛋白质变性。细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中,会使细胞壁破裂,染色体DNA和蛋白质变性,将质粒DNA释放到上清中。碱裂解法的原理:当菌体在NaOH 和SDS 溶液中裂解时,蛋白质与...
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