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紫外吸收波长260
测定DNA含量用什么方法?
答:
组成核酸分子的碱基,均具有一定的
吸收紫外
线特性,最大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的最大
吸收波长
是260nm,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。在
波长260
nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml;单链DNA或RNA为20μg/ml。可以次来计算核酸样品的浓度。分光光度法不但...
测定DNA含量用什么方法?
答:
组成核酸分子的碱基,均具有一定的
吸收紫外
线特性,最大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的最大
吸收波长
是260nm,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。在
波长260
nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml;单链DNA或RNA为20μg/ml。可以次来计算核酸样品的浓度。分光光度法不但...
核酸对
紫外
线的最大
吸收
峰是?
答:
因为变性时碱基对之间的氢键断开,相邻碱基对之间的堆积力也受到破坏(但不伴有共价键断裂),所以变性后的DNA在
260
nm的紫外光吸收增强(即A260增高),称为高色效应。在DNA变性中以DNA的热变性意义最大。DNA的热变性又称DNA的解链或融解作用;在DNA热变性过程中,使
紫外吸收
达到最大增值50%时的温度称...
测定DNA含量用什么方法?
答:
组成核酸分子的碱基,均具有一定的
吸收紫外
线特性,最大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的最大
吸收波长
是260nm,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。在
波长260
nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml;单链DNA或RNA为20μg/ml。可以次来计算核酸样品的浓度。分光光度法不但...
用
紫外
分光光度法测定核酸的缺点有哪些
答:
在不同pH 溶液中嘌呤、嘧啶碱基互变异构的情况不同,
紫外吸收
光也随之表现出明显的差异,它们的摩尔消光系数也随之不同.所以,在测定核酸物质时均应在固定的pH溶液中进行.核酸的摩尔消光系数(或吸收系数),通常以ε(ρ)来表示,即每升含有一摩尔核酸磷的溶液在
260
nm
波长
处的消光值(即光密度,或称为...
测A
260
/A280 A260/A230 就知道 DNA 纯不纯,这是为什么
答:
这是测核酸浓度和纯度用的。用
紫外
分光光度计测量样品时,不同成分的样品会有不同的吸光度。
260
纳米(nm)是核酸的最高吸收峰的
吸收波长
,280nm则是蛋白和酚类的。一般用A260/A280来检验DNA和RNA的纯度,纯DNA的这个比值约为1.8,纯RNA约为2.0.。
10、DNA复性后,其
紫外吸收
值如何变化( )
答:
它是由于化合物分子结构发生变化产生向蓝基团所引起的这种现象。如在相等物质的量的核苷酸溶液中,游离核苷酸在260nm处的
吸光
率较单链DNA高,而单链DNA的吸光率又比双链DNA高的现象。这是由于多核苷酸链结构中碱基自由旋转受阻所致。通过在
波长260
nm处记录溶液的光密度,能够追踪DNA的变性作用。
紫外
光谱的光谱图
答:
右图是乙酸苯酯的
紫外
光谱图。紫外光谱图提供两个重要的数据:
吸收
峰的位置和吸收光谱的吸收强度。从图中可以看出,化合物对电磁辐射的吸收性质是通过一条吸收曲线来描述的。图中以
波长
(单位nm)为横坐标,它指示了吸收峰的位置在
260
nm处。纵坐标指示了该吸收峰的吸收强度,吸光度为0.8。吸收光谱的...
请教A
260
/A280和OD260/OD280是什么意思
答:
这是测核酸浓度和纯度用的。用
紫外
分光光度计测量样品时,不同成分的样品会有不同的吸光度。
260
纳米(nm)是核酸的最高吸收峰的
吸收波长
,280nm则是蛋白和酚类的。一般用A260/A280来检验DNA和RNA的纯度,纯DNA的这个比值约为1.8,纯RNA约为2.0.。
为什么DNA变性会
吸收
更多UV光
答:
3)增色效应(hyperchromic effect)。指变性后DNA溶液的
紫外吸收
作用增强的效应。DNA分子中碱基间电子的相互作用使DNA分子具有
吸收260
nm
波长紫外
光的特性。在DNA双螺旋结构中碱基藏入内侧,变性时DNA双螺旋解开,于是碱基外露,碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收,故而产生增色效应。
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