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¸ãæ ¸è·é
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¶è¡çç©çååç»æä¸çåå¤ãå§å¶ç¢±åºå
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±è½åå¥ç³»ç»ï¼ï¼Cï¼Cä¸Cï¼C ä¸ï¼,è½å¤å¼ºçå¸æ¶250~280nm æ³¢é¿çç´«å¤å
.æ ¸é
¸ï¼DNA,RNAï¼çæ大紫å¤å¸æ¶å¼å¨260nm å¤.éµç
§Lambert-Beer å®å¾,å¯ä»¥ä»ç´«å¤å
å¸æ¶å¼çååæ¥æµå®æ ¸é
¸ç©è´¨çå«é.
å¨ä¸åpH 溶液ä¸åå¤ãå§å¶ç¢±åºäºåå¼æçæ
åµä¸å,ç´«å¤å¸æ¶å
ä¹éä¹è¡¨ç°åºææ¾çå·®å¼,å®ä»¬çæ©å°æ¶å
ç³»æ°ä¹éä¹ä¸å.æ以,å¨æµå®æ ¸é
¸ç©è´¨æ¶ååºå¨åºå®çpH溶液ä¸è¿è¡.
æ ¸é
¸çæ©å°æ¶å
ç³»æ°ï¼æå¸æ¶ç³»æ°ï¼,é常以εï¼Ïï¼æ¥è¡¨ç¤º,å³æ¯åå«æä¸æ©å°æ ¸é
¸ç£·ç溶液å¨260nm æ³¢é¿å¤çæ¶å
å¼ï¼å³å
å¯åº¦,æ称为å
å¸æ¶ï¼.æ ¸é
¸çæ©å°æ¶å
ç³»æ°ä¸æ¯ä¸ä¸ªå¸¸æ°,èæ¯ä¾èµäºææçåå¤çã溶液çpH å离å强度åçåå.å®ä»¬çç»å
¸æ°å¼ï¼pH = 7.0ï¼å¦ä¸ï¼
DNA çεï¼Ïï¼= 6 000 8 000
RNA çεï¼Ïï¼= 7 000 10 000
å°çè¸è
ºDNA é ç溶液ï¼pH = 7.0ï¼çεï¼Ïï¼= 6 600,DNA çå«ç£·é为9.2%,å«1μg/mL DNA é çç溶液å
å¯åº¦ä¸º0.020.RNA 溶液ï¼pH = 7.0ï¼çεï¼Ïï¼= 7 700~7 800,RNA çå«ç£·é为9.5%,å«1μg /mL RNA 溶液çå
å¯åº¦ä¸º0.022~0.024.éç¨ç´«å¤åå
å
度æ³æµå®æ ¸é
¸å«éæ¶,é常è§å®ï¼å¨260nm æ³¢é¿ä¸,æµåº¦ä¸º1μg/mL ç DNA 溶液å
¶å
å¯åº¦ä¸º0.020,èæµåº¦ä¸º1μg/mL çRNA 溶液å
¶å
å¯åº¦ä¸º0.024.å æ¤,æµå®æªç¥æµåº¦çDNA ï¼RNAï¼æº¶æ¶²çå
å¯åº¦OD260nm,å³å¯è®¡ç®æµåºå
¶ä¸æ ¸é
¸çå«é.该æ³ç®åãå¿«éãçµæ度é«,å¦æ ¸é
¸3μgï¼mL çå«éå³å¯æµåº.对äºå«æå¾®éèç½è´¨åæ ¸è·é
¸çå¸æ¶ç´«å¤å
ç©è´¨çæ ¸é
¸æ ·å,æµå®è¯¯å·®è¾å°,è¥æ ·åå
æ··ææ大éçä¸è¿°å¸æ¶ç´«å¤å
ç©è´¨,æµå®è¯¯å·®è¾å¤§,åºè®¾æ³äºå
é¤å».
ç±äºé解æ水解ä½ç¨,æ ¸é
¸çå
å¯åº¦å¯ä»¥å¢é«çº¦40ï¼
,è¿å°±æ¯ä¼æå¨ç¥çå¢è²æåºï¼hyperchromic effectï¼.å¨å¤§ååçæ ¸é
¸ä¸,æ°¢é®åÏ-é®ç¸äºä½ç¨æ¹åäºç¢±åºçå
±æ¯è¡ä¸º.å æ¤,æ ¸é
¸çå
å¯åº¦ä½äºææå®çæ ¸è·é
¸çå
å¯åº¦,该ç°è±¡ç§°ä¸ºåè²æåºï¼hypochromic effectï¼.
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