探究ph对酶活性的影响实验如下:
实验步骤:
1、取三支洁净的试管,编上号1,2,3,并分别注入1ml的新鲜的淀粉酶溶液。
2、依次向1号,2号,3号试管中注入蒸馏水,氢氧化钠溶液,稀盐酸各1ml并摇匀。
3、分别向1号,2号,3号试管中各注入2ml可溶性淀粉溶液,震荡摇匀。
4、将三支试管的下半部浸到37℃左右的温水中,保温5分钟。
5、向三支试管中各加入2ml斐林试剂,震荡摇匀。
实验现象:
一、温度对酶活性的影响
1号试管中的液体未变蓝,2号和3号试管中的液体变蓝,且2号试管蓝色比3号试管深。
二、pH对酶活性的影响
2号和3号试管中的液体未变蓝,1号试管中的液体变蓝。
实验结论:
1、在适宜的温度和适宜的ph条件下,酶的活性高。
2、温度和ph偏高或偏低,酶的活性明显下降。
影响酶活性的因素:
1、底物浓度
除选择适合的底物外,在实际应用中更多考虑的是底物浓度。由于【S】与反应速度V成双曲线关系,在酶活性测定时,要求【S】达到一定水平以保证酶活性与酶量成正比。
【S】范围一般选择在10~20Km为宜,此时反应速度基本达到最大反应速度,测定的误差在可接受范围。
2、酶浓度
在反应条件一定时,酶浓度与反应速度成正比。
按照中间产物学说,只有【S】>>【E】时,酶才能被底物分子饱和,反应速度才能达到最大值。因此当标本酶活力过高时,应将标本适当稀释后再加以测定。
3、温度
不同的酶最适温度可以不同,多数酶的最适温度在37~40℃,高于或低于最适温度,酶活性都降低。目前,酶活性的测定温度尚未统一,但常规实验室多使用37℃。
温度对酶促反应的影响程度通常用温度系数(Q10)表示。温度系数指温度每升高10℃,化学反应速度增加的倍数。Q10通常为1~2。