第1个回答 2022-12-10
粪便标本细菌学检验标准操作规程1.目的规范粪便标本细菌学检验标准操作规程,确保检验结果准确可靠。2.适用范围粪便培养。3.标本3.1 标本类型 粪便、直肠拭子。3.2 标本采集3.2.1 自然排便采集 自然排便后,挑取其脓血、黏液部分 2-3g,液体粪便取絮状物 2-3ml ,盛于灭菌容器内,或置于保存液(运送培养基) 、增菌培养基中送检。3.2.2 直肠拭子 如不易获得粪便时,或排便困难病人及婴儿,可用直肠拭子采取,即以无菌棉拭用保存液或生理盐水湿润后,插入肛门内 4-5cm(幼儿约 2-3cm)轻轻转动取出,插入卡 -布( Cary-Blair )运送培养基内或无菌容器内送检。3.2.3 粪便标本应该立即送检, 室温保存不超过 2 小时,如不能及时送检放入磷酸盐甘油( PH7.0)或转运培养基,但不能超过 24 小时。培养艰难梭菌的标本保存于 -20° C 以下。培养沙门菌和志贺菌的标本应放置磷酸盐甘油溶液中保存。保存弯曲杆菌和弧菌的标本,需加 CaCl2 (100mg/L )
试剂。3.3 标本拒收标准3.3.1 粪便标本放置时间超过 2 小时。3.3.2 送检的粪便标本混有尿液。3.3.3 直肠拭子未置于运送培养基中。4.试剂、仪器4.1 革兰染液、氧化酶试剂、 3%触酶、血琼脂平板、巧克力平板、麦克凯平板、相关生化试剂等。
4.2 VITEK
鉴定系统;革兰阴性菌鉴定卡(
GNI+
)、革
兰阴性菌药敏卡(
GNS )、革兰阳性菌鉴定卡(
GPI)、革兰
阳性菌药敏卡 ( GPS)、真菌鉴定卡 ( YBC )、药敏纸片、 TBA板条等,有效期及储存条件参见试剂说明书。4.3 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、CO2 培养箱等。5.细菌鉴定和药敏质控参见《质量管理程序》6.检验步骤接收标本后,立即对标本进行编号、登记。涂片检查 粪便标本因各种正常菌群含量甚多,仅以染色性和形态无法分辨是否为病原菌。因此粪便标本一般不作涂片检查。只有怀疑霍乱弧菌及菌群失调所致腹泻时,才作直接涂片检查(观察动力和菌群比
例)。培养6.2.1 沙门 -志贺菌培养 参见《沙门菌属检验标准操作规程》、《志贺菌属检验标准操作规程》