简述如何通过分光光度法判断DNA的纯度。

Question

如题所述

Answer 1

【答案】：分光光度法不但能确定核酸浓度，还可通过测定在260nm和280nm的紫外光吸收值的比值(A₂₆₀/A₂₈₀)估计核酸的纯度。纯净的DNA制品的A₂₆₀/A₂₈₀为1.8。
DNA样品A₂₆₀/A₂₈₀为1.8～2.0时，表明样品纯度已达到要求。
DNA样品A₂₆₀/A₂₈₀比值低于1.6时，表明有蛋白质或苯酚污染，应用苯酚-氯仿抽提，乙醇沉淀，纯化DNA。
DNA样品A260/A280比值高于2.0时，表明有RNA存在，可以考虑用RNA酶处理样品后，苯酚-氯仿抽提，除去RNA酶，再用乙醇沉淀。