制作微生物玻片标本通常采用涂片法,微生物包括细菌和真菌(或包括病毒),细菌个体小,通常用涂片法制作玻片标本。
涂片法是装片法制作玻片标本的一种方法。制作方法是:①细菌可以用细菌液均匀地涂布在载玻片上,盖上盖片直接观察或干燥后染色观察,染色观察通常需要洗去染色液后观察。
②制作真菌标本可以采用涂片法、撕片法、贴片法和切片法。单细胞或孢子或菌丝采用涂片法;大型真菌有较大的组织块,可以采用撕片法(如撕取一部分蘑菇丝)、贴片法(将蘑菇的菌褶贴到载片上)和切片法(切片的方式观察蘑菇的结构)。
涂片时应注意:
①载玻片必须清洁。
②载玻片要持平。
③涂层须均匀。涂抹液滴在载玻片中间偏右,用解剖刀刃或牙签等涂匀。
④涂层要薄。用另一载玻片作推片,沿滴有涂抹液的载玻片面(二载玻片夹角应为30°~45°)由右向左轻轻推动,涂成均匀一薄层。
⑤固定。如需固定可用化学固定剂或干燥法(细菌)固定。
⑥染色。细菌用亚甲基蓝,血液用瑞氏染液。染色液要盖住全部涂面。
⑦冲洗。用吸水纸吸干或烤干。
⑧封片。长期保存用加拿大的树胶片片。