高效液相色谱仪操作步骤如下：
1)． 过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.
2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
3)． 打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。
4)． 进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。
5)． 有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。
6)． 调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。
7)． 设计走样方法。
8)． 进样和进样后操作。
9)． 关机时，先关计算机，再关液相色谱。
10)． 填写登记本，由负责人签字。
11)． 流动相均需色谱纯度，水用20m的去离子水。
12)． 柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。
13)． 所有过柱子的液体均需严格的过滤。
14)． 压力不能太大，最好不要超过2000 psi。
高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。它是在生化和分析化学中常用的柱层析仪。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
该方法有效方便快捷地解决化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中得出想要的数据，成为重要的分离分析技术。
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