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PCR检验室中如何检查dNTP有没有DNase和RNase污染
如题所述
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推荐答案 2012-02-13
1 配一个PCR体系,用作阳性对照,确定有条带产生;
2 用未知dNTP代替阳性体系中的dNTP,进行pcr反应,看是否会出现条带;
3 将未知dntp进行加热反应(若有酶,会使酶变性),再替代阳性体系中的dntp,进行PCR反应
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其他回答
第1个回答 2012-02-14
挨个检验各个组分有无酶或核酸污染在实践中效率很低,所以拿到试剂盒后尽快在一个干净的实验台将各个组分(10Xbuffer、dNTP、primer)以及水等分装,实验中如发现可能存在污染就将用过的试剂丢弃。现在的PCR试剂盒很便宜,分装后更便宜,这样可提高效率,而不用花时间纠结
第2个回答 2012-02-14
做阳性和阴性对照看看dNTP是否影响PCR扩增。
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pcr检测中
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答:
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。试剂的储存条件和使用期限也会对PCR反应产生影响,因此应该注意检查试剂是否过期或存储不良。PCR反应条件:PCR反应体系包括引物、模板DNA/RNA、酶、缓冲液、Mg2+等组分。合理选择和优化这些组分的浓度和比例,以及PCR反应的温度和时间参数,可以显著影...
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