SDS-PAGE的主要用途,以及不同的凝胶浓 度在实际应用中的意义。

如题所述

主要用于分离蛋白质或者核酸,不同浓度的分辨率不一样,比如一定高浓度的胶可以分离质量分数为1000和1100的,而浓度降低后就难以实现1000与1100的分离。

化学聚合以过硫酸铵(APS)为催化剂,以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。在聚合过程中,TEMED催化过硫酸铵产生自由基,后者引发丙烯酰胺单体聚合,同时甲叉双丙烯酰胺与丙烯酰胺链间产生甲叉键交联,从而形成三维网状结构。

扩展资料:

在变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中,由于加入了变性剂——蛋白质变性剂常为SDS(SDS-PAGE),核酸变性剂常为尿素、甲酰胺等,故其分离仅依据于分子量大小。

发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子表面活性剂和强还原剂(SDS,即十二烷基硫酸钠)后,蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小(可以忽略电荷因素)。SDS是阴离子去表面活性剂,作为变性剂和助溶试剂。

能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二、三级结构。而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链。

参考资料来源:百度百科-SDS-PAGE

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第1个回答  2013-08-26
主要用于分离蛋白质或者核酸,不同浓度的分辨率不一样,比如一定高浓度的胶可以分离质量分数为1000和1100的,而浓度降低后就难以实现1000与1100的分离
第2个回答  2011-11-16
sds-page可以用来分离和鉴定蛋白质,另外可以根据迁移率大小测定某些蛋白质的分子量。根据要分离蛋白质的分子量选择胶的浓度,一般5-15%之间,可用来分离15-200左右KD的蛋白质。
实际应用:样品中蛋白的分离,定性比较不同组别的差异。可进一步做western blot 进行半定量比较各组间的差异。
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