(1)初代培养也称诱导培养。
培养基由于植物种类的不同而不同,通常是MS基本培养基加入适量的
植物生长调节剂及其他成分。首先在一-定温度(22~ 28C)下进行暗培养,待长出愈伤组织后转入光培养。此阶段主要诱导芽体解除休眠,恢复生长。
(2)继代培养也称增殖培养。 将见光变绿的芽体组织从诱导培养基转接到芽丛培养基上,在每天光照12~ 16h,
光照强度1000~ 3000lx条件下培养,不久即产生绿色丛生芽。将芽丛切割分离.进行继代培养,扩大繁殖.平均每月增殖一代.每代增殖5~10倍。为了防止变异或突变,通常只继代培养10~12次。根据需要,一部分进行生根培养,一部分仍继代培养。
(3)生根培养培养基通常 为1/2MS培养基加人适量的植物生长调节剂,如1/2MS+NAA(或IBA)0. lmg/L.切取增殖培养瓶中的无根苗,接种到生根培养基上进行诱根培养。有些易生根的植物在继代培养中通常会产生不定根.可以直接将生根苗移出进行驯化培养。或者将未生根的试管苗长到3~ 4cm长时切下来,直接栽到
蛭石为基质苗床中进行瓶外生根,效果也非常好,省时省工,降低成本。这个阶段可筛选淘汰生长不良和感病的试管苗。