DAB染色法也叫二氨基联苯胺法,用于检测细胞中过氧化物酶的活性部位。
原理:细胞颗粒中的过氧化物酶,能将过氧化氢中的氧释放出来,氧化二氨基联苯胺,形成金黄色沉淀而定位于过氧化物酶活性的部位。
使用前先用蒸馏水将B显色液(1:25)稀释为工作液,然后按比例(1:25)加入A显色液,混匀后立即使用。
显色时间1-30分钟,显色时间过长可引起本底增高,故应密切观察显色过程(一般3-10分钟最理想),并在本底较浅且达到适当显色强度时以流水漂洗终止显色反应。
扩展资料:
DAB溶液应低温密封保存。如有结晶析出,应确保结晶完全溶解再行使用;显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用。
DAB在常温下不稳定,每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱,以免因DAB分解影响实验,或因渗漏造成实验环境污染;DAB有潜在致突变作用,操作时应注意穿戴好防护用具。
DAB染色法也叫二氨基联苯胺法,用于检测细胞中过氧化物酶的活性部位。
原理:细胞颗粒中的过氧化物酶,能将过氧化氢中的氧释放出来,氧化二氨基联苯胺,形成金黄色沉淀而定位于过氧化物酶活性的部位。
使用前先用蒸馏水将B显色液(1:25)稀释为工作液,然后按比例(1:25)加入A显色液,混匀后立即使用。
显色时间1-30分钟,显色时间过长可引起本底增高,故应密切观察显色过程(一般3-10分钟最理想),并在本底较浅且达到适当显色强度时以流水漂洗终止显色反应。
二氨基联苯胺检测注意事项
1、DAB溶液应低温密封保存。如有结晶析出,应确保结晶完全溶解再行使用;
2、显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用;
3、DAB在常温下不稳定,每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱,以免因DAB分解影响实验,或因渗漏造成实验环境污染;
4、DAB有潜在致突变作用,操作时应注意穿戴好防护用具。
以上内容参考 百度百科——二氨基联苯胺
本回答被网友采纳产品适用范围该产品用于免疫组化染色,应用在Dako 自动染色系统上。
产品性能结构及组成试剂瓶A: 过氧化物酶标记物:过氧化物酶葡聚糖聚合物,Tris/HCl, 氯化钠, 牛血清白蛋白,5-溴-5-硝基-1,3-二恶烷, 4-氨基安替比林,聚乙二醇(PEG 3000), 酪蛋白, 吐温 20 pH7.6。 试剂瓶B:DAB底物缓冲液:咪唑, N,N'-乙基双(2-[2-羟基苯基]甘氨酸)(EDHPA), 乙基苯基聚乙二醇(Nonidet P-40),过氧化氢, 氯化苯二甲烃铵, pH 7.5。 试剂瓶C:DAB显色剂:3,3二氨基联苯胺四氯化碳溶于80%丙二醇中
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