TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)是检测
细胞凋亡的经典方法。听楼上实验室的同学说他们用BIODAI TUNEL法应用高活性的
基因重组末端
脱氧核糖核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡细胞断裂的DNA 3’-羟基(3’-OH)末端催化掺入荧光素-12-脱氧三磷酸尿苷(FITC-12-dUTP),通过检测FITC-12-dUTP标记的DNA片段来检测细胞凋亡。FITC-12-dUTP标记的DNA可以用荧光显微镜直接观察,也可用
流式细胞仪检测。FITC-12-dUTP标记和未标记dNTP处于最佳搭配比例,这样在进行3’-OH末端核苷酸掺入时,同一个断裂的DNA片段末端可以有更多的FITC-12-dUTP掺入,从而提高了检测的灵敏度,减少了背景反应
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