植物转基因技术有那些步骤和流程?

如题所述

第1个回答  2024-04-08
1. 目的基因克隆:首先,必须获取需要被转化的基因。例如,BT蛋白基因和抗草甘膦基因,就是从两种细菌中提取的。这些细菌来源的基因能够在植物中发挥同样作用。通过序列比对和分析,结合当前丰富的基因组数据库资源,可以轻松确定目标基因的序列。利用聚合酶链反应(PCR)技术,能够从原生物的基因组中精确地克隆出所需的基因片段。
2. 载体构建:接下来,将目的基因通过特定的酶连接到质粒分子上,形成一个含有目的基因的新质粒分子。
3. 转化:在这一步骤中,通常使用农杆菌作为载体将基因转移到植物细胞中。农杆菌能够侵染植物细胞,并促进细胞分裂,形成小疙瘩,即“冠瘿”。通过基因工程方法改造农杆菌,使其能够携带目的基因的DNA片段,并将其转入植物细胞内,整合到植物基因组中。除了农杆菌转化,还可以采用基因枪或电转化法进行基因转移。
4. 筛选:插入目的基因后的植物细胞会在培养基上表现出特定的信号,例如对抗生素的抗性,这表明基因已经成功整合到植物基因组中。通常使用报告基因,如编码抗生素分解酶的基因,来筛选成功转化的植物细胞。科研中常用这种方法,而商业化种植的转基因植物也需要通过一系列检测,确保目的基因正确表达,且不产生有害的非目标性状。
通过以上步骤,最终获得的植物才是真正意义上的转基因植物。详情