所处外界环境温度、溶剂、pH、荧光熄灯灭剂等都影响荧光效率甚至影响结构及立体构象影响荧光光谱荧光强度解利用些素影响提高荧光析灵敏度选择性 1、温度 温度于溶液荧光强度着显著影响般情况随着温度升高荧光物质溶液荧光效率荧光强度降低温度升高运速度加快间碰撞概率增加使辐射跃迁增加降低荧光效率例荧光素钠乙醇溶液0℃温度每降低10℃荧光效率增加3％—80℃荧光效率φf1 2、溶剂 同物质同溶剂其荧光光谱位置强度都差别般情况荧光波随着溶剂极性增移荧光强度增强极性溶剂π→π*跃迁需要能量差ΔE且跃迁概率增加使紫外吸收荧光波均向移强度增强 溶剂粘度减增加间碰撞机使辐射跃迁增加荧光减弱故荧光强度随溶剂粘度减减弱由于温度溶剂粘度影响般式温度升溶剂粘度变温度升荧光强度降 3、pH影响 荧光物质本身弱酸或弱碱溶液pH该荧光物质荧光强度较影响主要弱酸弱碱离结构所同同酸度离间平衡改变荧光强度差异每种荧光物质都其适宜发射荧光存形式相应pH范围保持荧光物质溶剂间离解平衡 苯胺pH7~12溶液主要形式存由于—NH2提高荧光效率取代基故苯胺发蓝色荧光pH＜2pH＞13溶液均苯胺离形式存故能发射荧光 4.荧光熄灭剂 荧光熄灭称荧光猝灭指荧光物质与溶剂或其溶质相互作用引起荧光强度降低现象荧光熄灭剂促进种现象发 5.散射光 散射光荧光测定干扰尤其波比入射光波更拉曼光其波与荧光波接近荧光测定干扰更必须采取措施消除
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