如何取小鼠的脂肪组织

Question

如题所述

Answer 1

取脂肪组织：1）附睾脂肪组织：在下腹部找到小鼠睾丸，用镊子将其提起，附着于其上的白色脂肪为附睾脂肪，沿输精管将其剥离至睾丸末端后剪下。2）腹股沟脂肪：用眼科剪于小鼠后肢皮肤与肌肉间钝性分离，剪刀尖端顶住皮肤以避免切断皮下脂肪，然后纵切皮肤暴露腹股沟脂肪，剥离其中的腹股沟淋巴结，将脂肪组织剪下。3）棕色脂肪：剪开肩胛骨下皮肤，暴露肩胛区可见呈蝴蝶状对称棕色脂肪组织，去除覆盖其表面的部分白色脂肪组织后将其取下，将肩胛骨翻开亦可见其内侧棕色脂肪组织，用弯镊挂下。以上所有脂肪组织一经取下后于冰冷生理盐水中漂洗，去除毛发、血迹，依实验目的或冻存于液氮中或装入包埋盒中保存于10%中性甲醛中。

Answer 2

您好，取小鼠的脂肪组织可以按照以下步骤进行：
1. 将小鼠颈椎脱臼处死，浸泡于酒精中5-10分钟。
2. 剪开小鼠背部皮肤，暴露iWAT （inguinal White adipose tissue，皮下脂肪组织）。
3. 沿着输精管将脂肪组织剥离至睾丸末端后剪下。
4. 用眼科剪于小鼠后肢皮肤与肌肉间钝性分离，剪刀尖端顶住皮肤以避免切断皮下脂肪，然后纵切皮肤暴露腹股沟脂肪，剥离其中的腹股沟淋巴结，将脂肪组织剪下。
5. 剪开肩胛骨下皮肤，暴露肩胛区可见呈蝴蝶状对称棕色脂肪组织，去除覆盖其表面的部分白色脂肪组织后将其取下，将肩胛骨翻开亦可见其内侧棕色脂肪组织，用弯镊挂下。
需要注意的是，小鼠周龄越小，脂肪细胞分化能力越强。在实验操作中需要保证无菌条件。

Answer 3

你好，提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液。一般是1：1进行配制。用的裂解液我们是RIPA。 将组织用液氮研磨碎了，然后按量加入裂解液，细胞量在10七次方左右是100微升。冰浴裂解20分钟（间断摇动）。然后4摄氏度离心12000rpm，15分钟。