叶绿体中叶绿素a、 b的含量如何计算?

如题所述

叶绿素含量的测定及计算结果如下:

叶绿素a、b在红光区的最大吸收峰分别为663nm和645nm,可用以下联立方程求叶绿素溶液中的叶绿素a、b的含量。

D663=82.04Ca9.27Cb……………………(1)

D645=16.75Ca45.6Cb……………………(2)

式中D663、D664分别为波长663nm和645nm处测定叶绿素溶液的光密度;Ca、Cb分别为叶绿素a、b的浓度(g/L);82.04、9.27分别为叶绿素a、b在波长663nm时的比吸收系数,16.75、46.6分别为叶绿素a、b在波长645nm时的比吸收系数。

解联立方程(1)、(2)则得:

Ca=0.0127D663-0.00269D645……………(3)

Cb=0.0229D645-0.00468D663……………(4)

如把叶绿素含量单位由g/L改为mg/L,(3)、(4)式则可改写为:

Ca(mg/L)=12.7D663-2.69D645…………(5)

Cb(mg/L)=22.9D645-4.68D663…………(6)

叶绿素总量C(mg/L)=CaCb=20.2D6458.02D663……(7)

叶绿素总量也可根据下式求导

D652=34.5×C……………(8)

652nm为叶绿素a与b在红光区吸收光谱曲线的交叉点(等吸收点),34.5为叶绿素a、b在波长652nm处的吸收系数。

DC=D652/34.5(g/L)Cd

DC=D652×1000/34.5(mg/L)………(9)

因此,利用(5)、(6)式可分别计算叶绿素a与b含量,利用(7)式或(9)式可计算叶绿素总量。

叶绿体色素的提取液中除含有叶绿素a与b外,还含有叶黄素和胡萝卜素,因为叶黄素和胡萝卜素的吸收光谱均在蓝光区,故不会干扰叶绿素含量在红光区的分光光度法测定。

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