HE染色步骤：
1、脱蜡，脱蜡二甲苯Ⅰ、Ⅱ各10分钟，事先准备好盖玻片。
2、覆水，100%（Ⅰ、Ⅱ）、90%、80%、70%酒精各5分钟，自来水冲洗5分钟×3。
3.、苏木精染色5分钟，根据染色情况，可以适当增加或减少染色时间，流水冲洗。
4、5%乙酸分化1分钟，流水冲洗，用吸管滴加乙酸，布满玻片上的组织即可，分化后颜色变浅了一些，成为蓝色。
5、返蓝：返蓝液，实验室没有，也可不用。
6、伊红染色1分钟，根据染色情况，可以适当增加或减少染色时间，流水冲洗。
7、脱水：70%、80%、90%、100%酒精各10秒，二甲苯1分钟，可以在通风橱自然晾干再封
片，约5分钟左右。
8、滴上中性树胶，封片，用吸管滴上一滴即可，尽量少滴，但压片后要将组织全部覆盖完，避免中间有气泡。
扩展资料：
he染色原理：
易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia )；而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性（neutrophilia)。
构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多，它们有不同的等电点。在普通染色法中，染色液的酸碱度为pH6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为嗜碱性。
而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度，pH值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性；pH值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。
所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。脱氧核糖核酸（DNA）两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
参考资料来源：百度百科—he染色
(1)二甲苯（Ⅰ） 15min
(2) 二甲苯（Ⅱ） 15 min
（3）二甲苯：无水乙醇=1:1 2min
(4)100%乙醇（Ⅰ） 5min
(5)100%乙醇（Ⅱ） 5 min
(6)80%乙醇 5min
(7)蒸馏水 5 min
(8)苏木精液染色 5 min
(9) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s
(10) 1%盐酸乙醇 1-3 s
(11) 稍水洗 10-30 s
(12)蒸馏水过洗 1-2 s
(13) 0.5%伊红液染色 1-3 min
(14) 蒸馏水稍洗 1-2 s
(15) 80%乙醇稍洗 1-2 s
(16) 95%乙醇（Ⅰ） 2-3 s
(17) 95%乙醇（Ⅱ） 3-5 s
(18) 无水乙醇 5-10 min
(19) 石炭酸二甲苯 5-10 min
(20) 二甲苯（Ⅰ） 2 min
(21) 二甲苯（Ⅱ） 2 min
(22) 二甲苯（Ⅲ） 2 min
(23) 中性树胶封固
注：①第（11）、（12）步可省去，（13）步冲水时间需延长至20-30min。
②第（21）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。 （1）冰冻切片固定 10～30 s
（2）稍水洗 1～2 s
（3）苏木精液染色（60℃） 30～60 s
（4）流水洗去苏木精液 5～10 s
（5）1%盐酸乙醇 1～3 s
（6）稍水洗 1～2 s
（7）促蓝液返蓝 5～10 s
（8）流水冲洗 15～30 s
（9）0.5%曙红液染色 30～60 s
（10）蒸馏水稍洗 1～2 s
（11）80%乙醇 1～2 s
（12）95%乙醇 1～2 s
（13）无水乙醇 1～2 s
（14）石炭酸二甲苯 2～3 s
（15）二甲苯（Ⅰ） 2～3 s
（16）二甲苯（Ⅱ） 2～3 s
（17）中性树胶封固。
注：第（14）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。
染色结果：细胞核蓝色，胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。 细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。
着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。 （1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均匀，无皱褶无刀痕；
（2）染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。
1.试剂：0.5%醇溶性伊红染液，改良的哈瑞（Harris）苏木素，0.5%盐酸酒精溶液
1.1 伊红：
配制方法：中性红 0.5g，80%酒精100ml,将伊红溶于酒精内搅拌，全部溶解后即可使用。
1.2苏木精：
配制方法：A液： 苏木素1g，无水酒精10ml
B液：硫酸铝钾20g，蒸馏水200ml
两液分别溶解后混合，加热煮沸后，慢慢加入红色氧化汞0.5g，此时有大量气泡产生，故容器要大，以防液体溢出，然后将染液迅速冷却，冷却后过滤，并每100ml加入冰醋酸6ml，甘油10ml。
1.3 0.7%盐酸酒精溶液
配制方法：盐酸0.7ml，70%酒精100ml
2.材料：石蜡切片
[操作流程]
1.将石蜡切片置于烘箱中60℃烤1～2h；
2.石蜡切片常规二甲苯，乙醇脱蜡至水，
3.苏木素染10分钟，
4.流水冲洗，去余色，5.0.7%盐酸乙醇分化数秒钟，
6.流水冲洗，切片变蓝约15分钟，
7.95%乙醇30秒钟，
8.酒精性伊红染30秒，
9.I 95%乙醇30秒钟，
10.II 95%乙醇30秒钟，
11.I 100%乙醇30秒钟，
12.II100%乙醇30秒钟，
13.石碳酸二甲苯30秒钟，（1： 4石碳酸1-二甲苯4）
14.I二甲苯30秒钟，
15.II二甲苯30秒钟，
16.中性树胶封片。
[实验结果]： 镜下观察细胞核呈蓝色；细胞浆一般呈红色；胶原纤维呈不同程度的红色，红细胞呈亮红色；
he染色的操作步骤：
将石蜡切片置于烘箱中60℃烤1～2h；
石蜡切片常规二甲苯，乙醇脱蜡至水，
苏木素染10分钟，
流水冲洗，去余色，
0.7%盐酸乙醇分化数秒钟，
流水冲洗，切片变蓝约15分钟，
7.95%乙醇30秒钟，
8.酒精性伊红染30秒，
I 95%乙醇30秒钟，
II 95%乙醇30秒钟，
I 100%乙醇30秒钟，
II100%乙醇30秒钟，
石碳酸二甲苯30秒钟，（1： 4石碳酸1-二甲苯4）
I二甲苯30秒钟，
II二甲苯30秒钟，
中性树胶封片。
HE染色操作流程：
HE染色，即是苏木精-伊红染色法，是形态学最常用的染色方法，在质量较佳的HE染色切片上，各种组织或细胞的一般形态结特点都可以观察到。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。