第1个回答 2020-04-30
通常,在外植体经脱分化形成愈伤组织的过程中,生长素和细胞分裂素是必要的。但由于植物种类及所取部分的不同,诱导其形成愈伤组织所需的激素浓度和组合不同。双子叶植物一般采用生长素/细胞分裂素比例高的配方;单子叶植物的细胞增殖比双子叶植物
要求较高的生长素浓度而对细胞分裂素无明显反应。在大多数情况下,只用2,4-D就可以成功地诱导愈伤组织。在再分化的过程中,激素的种类和浓度对培养中的再生方式和器官发生的类型可产生不同的影响。例如在矮牵牛茎、叶组织切块的培养中,用同一浓度(1mg/L)不同种类的生长素(IAA、NAA、2,4-D)处理,可得到不同的结构。IAA只引起愈伤组织的有限生长;NAA可引起根的大量形成;2,4-D则促进愈伤组织产生,培养两周后还有胚状体发生。用2,4-D作进一步浓度实验,发现0.1-0.5mg/L的浓度,可诱导材料形成胚状体,提高2,4-D浓度(2mg/L),促进愈伤组织生长,但抑制胚状体形成。
生长素,特别是2,4-D是控制体细胞胚状体发生的重要因素。在不少材料中均可看到,2,4-D对促进胚状体的发生虽有良好效果,但对胚状体的形成和发育有抑制倾向。所以,为了促进培养物分化,应及时除去或减少培养基中2,4-D。
激素的调控作用不但决定于激素的种类和浓度,而且还决定于激素的相互之间的配比和绝对用量。50年代,F.Skoog和C.O.Miller在烟草茎髓愈伤组织中发现激动素/生长素的比例高时,利于芽的分化;比例低时,利于根的分化;两者比例适中水平时,愈伤组织占优势。激动素/生长素比例控制器官发生的这种模式,以后大量的实验结果表明,它在组织培养中(特别对双子叶植物的器官发生)具有较普遍意义,但激素之间的配比控制器官发生的类型还受激素绝对用量的影响。例如在番茄叶愈伤组织培养中,用2mg/L
IAA+2mg/L
KT,发生根;茎芽则仅在用4mg/L
IAA+4mg/L
KT时发生。