母牛发情后适时配种是提高受胎率的关键。最适输精时间由母牛的排卵时间、卵子到达输卵管壶腹部保存受精能力的时间、精子达到受精部位和在母牛生殖道内保存受精能力的时间来决定。一般情况下母牛排卵发生在发情结束后10小时左右，而卵子进入输卵管壶腹部保持受精能力的时间约为20小时，精子进入母牛生殖道后2～4小时就能到达输卵管壶腹部，并在30小时内保持有受精能力。因此母牛在发情末期或排卵前6小时配种为宜。生产中主要根据发情母牛已不接受爬跨，表现安静，阴道黏液变黏稠，牵缕性强，用拇指和食指拉缩7～8次不断，直检时滤泡突出于卵巢表面，波动感明显，有一触即破的感觉时，输精最为合适。在生产实践中，一般早晨（8点前）发现母牛发情（接受爬跨），当日午后输精；中午（9～14点）发现，当日晚输精；午后（15时后）发现，次日早晨输精。在一个发情期内输精两次，受胎率有所提高。进行两次输精时，可在发现发情时输精一次，间隔10～12小时再输精一次。也有研究表明对牛采用发情接受爬跨后12～13小时进行输精受胎率较高。
实践中还应注意一般青年牛性欲旺盛，排卵很快，输精时间适当提前；年老体弱的牛和一些高产牛性欲较差，排卵迟，输精时间应推迟一些。因此，最好通过直肠检查，根据卵泡发育情况确定适宜的输精时机。