都说HE染色法最常用的,谁能给我具体讲讲...

知道的朋友告诉我一下..急急

第1个回答  2015-12-23
HE 染色法为苏木精-伊红染色法,是石蜡切片技术里常用的染色法之一,也是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基础、最广泛的技术方法。
属性为碱性的苏木素染色液可以使细胞着蓝色,为酸性的伊红使细胞着红色,其结果胞核呈蓝色,胞浆呈红色。两种不同的染色液使细胞通过颜色来改变折光率,在光镜下呈现出细胞图像。
HE染色法之所以成为细胞染色最常用的方法是因为HE染色法过程中除化学反应外,还有物理作用中吸附、吸收效果,使HE染色提供良好的核浆对比染色效果。追问

你好,能告诉下具体步骤吗,谢谢啦 急急急

追答

实验步骤
1、样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS洗涤3次。
2、样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。
3、染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。
4、分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。
5、染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。
6、吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片。
若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可。

追问

好详细啊,谢谢,那HE染液是自己配置的吗?

追答

自己配置也可以,以下是配置方法
1.Harris氏苏木素(1990)
2.苏木素2.5g
3.无水酒精25ml
4.硫酸铝钾(钾明矾)50g
5.蒸馏水500ml
6.黄*色氧化汞1.25g
7.冰醋酸20ml
先将苏木素溶于酒精(平时也可将苏木素以10%的浓度溶解好,贮存备用取一2000ml的烧杯,倾入钾明矾,加入蒸馏水,于电炉上加热,熔解钾明矾,完全熔解后,待温度至90℃左右时,加入预先溶解好的酒精苏木素,继续加热至沸腾,延续3-5min,此时溶液逐渐加深,变为紫红色,拔离电源,加入黄*色氧化汞,当充分氧化后,重新插上电源继续加热3-5min,此时溶液变深紫色,拔去电源,直接将烧杯插入预先备好的冰水里,放于暗处,第二天过滤后加入冰醋酸,即可使用三个月,但据我们的实践及多年的经验认为,只要掌握好切片的“无水化”,该染液可反复使用达一年之久。
你也可以买现成的HE染色试剂盒,里面东西很全。我的是从索莱宝买的,价格还可以。你可以参考一下:http://www.solarbio.com/goods-1225.html

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