植物基因转化的发根农杆菌介导转化法是怎样做的?

如题所述

发根农杆菌(emphasis:role=italicAgrobacterium:rhizogenesemphasis)是与根癌农杆菌同属的一种病原土壤杆菌,与根癌农杆菌不同的是,发根农杆菌从植物伤口入侵后,不能诱发植物产生冠瘿瘤,而是诱发植物产生许多不定根。

这些不定根生长迅速,不断分枝成毛状,故称之为毛状根或发状根(hairy:root)。发状根的形成是由存在于发根农杆菌中的Ri质粒(root:inducing:plasmid,根诱导质粒)所决定的。i质粒是发根农杆菌染色体外的遗传物质。属于巨大质粒,其大小为200800kb。Ri质粒和Ti质粒不仅结构、特点相似,而且具有相同的寄主范围和相似的转化机理,与Ri质粒转化相关的也主要为Vir区和T-DNA区两部分。Ri质粒的T-DNA也存在冠瘿碱合成基因,且这些合成基因只能在被侵染的真核细胞中表达。

与Ti质粒相同,Ri质粒基因转化载体的构建也主要采用有共整合载体和双元载体系统。由Ri质粒诱发产生的不定根组织,经离体培养后,一般都可再生完整的植株,因此,利用Ri质粒作为转基因植物的载体,同样具有诱人的前景。

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