物体表面细菌培养采样方法

如题所述

物体表面细菌培养采样方法有接触皿采样法、淋洗采样法、拭子采样法三种。

一、接触皿采样法

TSA、NA和SDA培养基接触皿,取下皿盖将培养基凸起面按压到采样物体表面5s—10s后,将皿拿起盖好皿盖,细菌置于30℃ —35℃培养48h。

TSA接触皿测试菌种为金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、枯草芽胞杆菌、黑曲霉、白色念珠菌;NA接触皿测试菌种为金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、枯草芽胞杆菌;SDA接触皿测试菌种为黑曲霉、白色念珠菌。

二、淋洗采样法:

将20ml生理盐水缓缓倾注到装有菌种载体的平皿中,倾注时注意液体倾注点处于菌种载体中心位置,全部倾注后,将无菌平皿轻轻向上下左右各晃动5次,晃动幅度大概在2cm—3cm。

之后使用移液枪将平皿中的生理盐水全部取出,作为供试液,取10ml 进行活菌计数,采用薄膜过滤法,滤干后取出滤膜,细菌滤面朝上贴于TSA90mm平板培养基和NA90mm平板培养基上,置于30℃—35℃培养48h观察计数。计数结果的2倍为淋洗取样活菌计数结果。

三、拭子采样法

取无菌拭子,用无菌的0.9%氯化钠溶液5ml 浸湿,在取样点面上擦拭,完成后迅速将拭子放入无菌试管中并密封,加入10ml0.9%生理盐水,使用旋涡振荡器充分振荡后作为供试液。

取5ml进行活菌计数采用薄膜过滤法过滤,滤干后取出滤膜,细菌滤面朝上贴于TSA90mm平板培养基和NA90mm平板培养基上,置于30℃—35℃培养48h观察计数。计数结果的2倍为擦拭取样活菌计数结果。

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