【目的】
了解蛙类坐骨神经干产生动作电位后其兴奋性的规律性变化。学习绝对不应期和相对不应期的测定方法。
【原理】
神经组织和其他可兴奋组织一样，在接受一次刺激产生兴奋以后，其兴奋性将会发生规律性的变化，依次经过绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，然后再回到正常的兴奋水平。采用双脉冲刺激。
将两刺激脉冲间隔由最小逐渐增大时，开始只有第一个刺激脉冲刺激产生动作电位(action potential, AP)，第二个刺激脉冲刺激不产生AP，当两刺激脉冲间隔达到一定值时，此时第二个刺激脉冲刚好能引起一极小的AP，这时两刺激脉冲间隔即为绝对不应期。
继续增大刺激脉冲间隔，这时由第二个刺激脉冲刺激产生的AP逐渐增大，当两刺激间隔达到某一值时，此时由第二个刺激脉冲刺激产生的AP，其振幅刚好和由第一个刺激产生的AP相同，这时两刺激脉冲间隔即为相对不应期。继续增大刺激间隔，此时由两刺激脉冲产生的AP将始终保持完全一致。
【预习要求】
与模拟实验3相同
【材料】
蟾蜍或蛙;标本屏蔽盒、任氏液、微机生物信号采集处理系统。
【方法】
系统连接和仪器 参数设置(1)RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“肌肉神经”或“生理科学实验项目”菜单中的“神经干兴奋不应期的测定”或“神经干兴奋不应期的自动测定”项目。系统进入该实验信号记录状态。
仪器参数：1通道时间常数0.02s、滤波频率1KHz、灵敏度4mV，采样频率80KHz，扫描速度1ms/div。双刺激激模式，最大刺激强度，刺激波宽0.1ms，起始波间隔0.5 ms，延迟2ms，同步触发。
PcLab和MedLab系统：点击“实验”菜单，选择“常用生理学 实验”或“文件”菜单“打开配置”中的“神经干动不应期测定”项目。
系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：2通道放大倍数200、交流耦合(AC)、上限频率10KHz，通道4，记录刺激标记，放大倍数5～50，采样间隔20ms;自动间隔调节刺激方式，最大刺激强度，周期1s，波宽0.1ms，首间隔0.5ms，增量0.2ms，末间隔：30ms，延时1ms;记忆示波方式，刺激器触发。
【观察项目】
设置刺激器“双次”刺激方式，增加刺激电压至1.5V，动作电位出现在示波器的屏幕上。调节扫描速度为“1ms/cm”。
调节刺激器的波间隔，逐渐减小，可见到一前一后两个振幅相同的动作电位。第一个动作电位由条件性刺激引起，第二个动作电位由检验性刺激引起。
逐渐减小波间隔，待第二个动作电位振幅降低时，记录下刺激波间隔时间。继续减小波间隔直至第二个动作电位消失，记录此时的刺激波间隔时间。
一、实验目的：
学习蛙坐骨神经干标本的制备，观察坐骨神经干的双相动作电位波形，并测定最大刺激强度 测定坐骨神经干双相动作电位的传导速度 学习绝对不应期和相对不应期的测定方法 观察机械损伤或局麻药对神经兴奋和传导的影响
二、实验对象：
牛蛙。
三、实验药品和器材：
任氏液，2%普鲁卡因，各种带USB接口或插头的连接导线，神经屏蔽盒，蛙板，玻璃分针，粗剪刀，眼科剪，眼科镊，培养皿，烧杯，滴管，蛙毁髓探针，BL-420N系统。
四、主要方法和步骤：
捣毁脑脊髓、分离坐骨神经、安放引导电极、安放刺激电极、启动试验系统、观察记录、保存、编辑输出。
五、实验结果：
当剪断两引导电极之间的神经干时，第二通道的双相动作电位消失。 故机械损伤对神经动作电位传导的阻滞作用比局麻药强。
六、实验注意事项：
牛蛙腓肠肌后的神经干分支较难找，可以适当剪开周围软组织辅助找到。每隔一段时间，记得给神经干（及未分离时的周围软组织）滴加任氏液以尽量保持组织的活性。 分离出的神经要尽量长，以保证实验数据的完整性。
滴加普鲁卡因时，液滴可能会垂在神经干上的两个引导电极之间，此时可以用滴管将其引流到神经干末端无引导电极的地方，滴到神经屏蔽盒底部。
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