什么方法最快检验出死亡细胞的数目

Question

如题所述

Answer 1

TUNEL检测。基因组DNA断裂时，暴露的3''-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。TUNEL检测反应时间过长，或TUNEL检测反应过程中反应液渗漏，细胞或组织表面不能保持湿润，也可能出现非特异性荧光。TUNEL或缺口翻译法实际上是分子生物学与形态学相结合的研究方法，对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色，能准确的反应细胞凋亡最典型的生物化学和形态特征，可用于石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片、培养的细胞和从组织中分离的细胞的细胞凋亡测定，并可检测出极少量的凋亡细胞，灵敏度远比一般的组织化学和生物化学测定法要高，因而在细胞凋亡的研究中已被广泛采用。（5）将细胞重悬于含100ug/ml RNase A和50ug/ml PI的PBS中，室温孵育30min；（6）将经PI染色和RNase A消化后的细胞悬液用300目的尼龙膜过滤后即可利用流式细胞仪进行细胞周期分布和凋亡细胞定量的分析。5、Q：我要做流式分析细胞周期，我大概收集了10的6次方细胞，但细胞在乙醇固定之后，还看到有细胞沉淀的，但PBS洗涤两次之后，就基本没什么细胞沉淀了，上机发现就发现不了细胞了。10、Q：流式细胞仪观察细胞周期样品怎样准备？细胞凋亡细胞凋亡科技名词定义。细胞是如何准确而又精确调节细胞凋亡呢？癌基因中一大类属于生长因子家族，也有一大类属于生长因子受体家族，这些基因的激活与表达，直接刺激了肿瘤细胞的生长，这些癌基因及其表达产物也是细胞凋亡的重要调节因子许多种类的癌基因表达以后，即阻断了肿瘤细胞的凋亡过程，使肿瘤细胞数目增加，因此，从细胞凋亡角度来理解肿瘤的发生机制，是由于肿瘤细胞的凋亡机制，肿瘤细胞减少受阻所致。Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒/Annexin V-FITC Apopto...Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit)是用FITC标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。用带有绿色荧光的荧光探针FITC标记的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷酯酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。细胞免疫染色。1，PBS洗涤细胞三次2，用100ul抗体结合Buffer悬浮细胞，在EP管内操作，加入适当浓度的一抗，冰上1小时3，抗体结合Buffer洗涤细胞三次，完全去除上清4，用100ul抗体结合Buffer悬浮细胞，加入适当浓度的二抗，冰上1小时5，抗体结合Buffer洗涤细胞三次，完全去除上清6，若上流式检测，可直接用500ulPBS悬浮细胞7，若用荧光显微镜观察，可用适量PBS悬浮细胞，直接加到12孔板或6孔板中，等细胞沉下来后即可观察。体外MRI示USPIOCTGFP与Bel7402细胞孵育后的MR信号在T2WI上较USPIO组明显降低,而竞争组MR信号在T2WI上较USPIO组稍降低(图3)。普鲁士蓝染色结果显示Bel7402细胞与USPIOCTGFP的结合明显多于USPIO,且Bel7402细胞与游离多肽预孵育后,细胞与USPIOCTGFP的结合显著减少，可以推论CTGFP修饰的纳米粒子大大改善了细胞与纳米粒子的结合,修饰多肽后使纳米粒子获得了选择性,实现了CTGFP/avb3投递系统的靶向作用。悬浮生长的细胞：细胞悬液倒入10-15ml离心管，2000转/分离心10分钟收集细胞，倒出培养液，加2ml无菌冰冷的PBS缓冲液，混匀使细胞沉淀重悬洗涤细胞2次。6.提取的RNA加适量DEPC处理去离子水溶解(组织及培养细胞所提RNA加水50－100ul外周血白细胞所提RNA加水10－15ul)。标准管中分别加入10mg/mlBSA 0ul、2.5ul、5.0ul、7.5ul、10ul, 每管加生理盐水至100ul(蛋白含量分别为0、25、50、75、100ug)，同时以100ul的生理盐水作空白对照。在融合后的细胞群体里，尽管未融合的正常脾细胞和相互融合的脾细胞是HGPRT+，但不能连续培养，只能在培养基中存活几天，而未融合的HGPRT-骨髓瘤细胞和相互融合的HGPRT-骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活，只有骨髓瘤细胞与脾细胞形成的杂交瘤细胞因得到分别来自亲本脾细胞的HGPRT和亲本骨髓瘤细胞的连续继代特性，而在HAT培养基中存活下来。RPMI-1640培养基原液96ml100*L.G.溶液1ml双抗溶液1ml7.5% NaHCO3溶液1-2mlHEPES溶液1ml.细胞有丝分裂口诀。这时候，每条染色体的着丝点的两侧，都有纺锤丝附着在上面，纺锤丝牵引着染色体运动，使每条染色体的着丝点排列在细胞中央的一个平面上。一、分裂间期 二、分裂期的前期 三、分裂期的中期 四、五、分裂期的后期 　　 六、分裂期的的末期 1.核仁 2.中心粒 3.星射线 4.纺锤体 5.染色体 　　细胞有丝分裂的重要特征，就是新代细胞的染色体经过复制以后，平均分配到两个子细胞中去。等···有好多种方法

Answer 2

台盼蓝(Trypan Blue)是检测细胞膜完整性最常用的生物染色试剂。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝，而死亡的细胞，膜的完整性丧失，通透性增加，细胞可被台盼蓝染成蓝色。依据此原理，细胞经台盼蓝染色后，可通过显微镜，直接镜下计数或拍照后计数，实现对细胞存活率比较精确的定量分析。本回答被提问者和网友采纳

Answer 3

只有血球计数板。

Answer 4

指示剂