缓冲液的作用

如题所述

缓冲液的作用是能在加入少量酸或碱和水时,抵抗pH改变的溶液,维持溶液的pH值相对稳定。其解释内容如下:

1、缓冲溶液指的是由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液,能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响,从而保持溶液的pH值相对稳定。在生物体中有三种主要的pH缓冲体系,它们是蛋白质、重碳酸盐缓冲体系。

2、缓冲液在生物化学、分子生物学、制药等领域也有广泛的应用,常常用于维持实验体系的酸碱度。这是因为研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到研究工作的成效。例如,“提取酶”实验中,如果体系的pH值发生大幅度变动,酶活性就可能下降甚至完全丧失。

3、冲液通过其独特的化学性质,起到了维持pH稳定、保护生物正常生理环境以及提高实验效果等重要作用。当我们在生化研究工作中向某些实验体系中加入少量酸或碱,或者进行稀释时,如果使用了缓冲液,则它能有效地抵抗pH的改变,保持pH值的稳定。

使用缓冲液的注意事项

1、注意缓冲液的保存条件和期限。例如,MOPS缓冲液可以在2~8℃下保存至少6个月,并且应通过0.2μm滤膜进行过滤除菌。避免缓冲液长时间存放在定量加液器中,这是因为这种设备并不完全密闭,容易导致挥发性成分(如氨或醋酸)的流失。

2、许多缓冲溶液包含易挥发组分,如氨-氯化铵中的氨和醋酸钠-醋酸中的醋酸。这意味着它们应适当配制,并在使用后立即密闭并存放在低温环境中,以防止组分挥发导致溶液失效。当进行有核酸酶参与的实验时,可考虑使用经过高压灭菌处理且无核酸酶的MOPS溶液。

3、在使用缓冲液时,需要根据实验要求选择合适的缓冲液种类及其浓度。例如,HEPES缓冲液是一种优良的生物学研究用缓冲液,其PH缓冲范围为6.8-8.2,常用于细胞培养的缓冲体系。

4、缓冲液使用前必须过滤。溶剂、样品易受到细菌和霉菌的影响,要注意清洁。一般不能直接用有机溶剂做清洗冲洗。梯度洗脱时,选低吸收值的缓冲液。例如:梯度洗脱时,缓冲液与有机相应预混,以防止析盐。在保证峰不拖尾的情况下,尽可能选用低浓度的缓冲盐,防止析盐。

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