紫外分光光度计如何使用 详细�0�3

如题所述

紫外可见分光光度计原理是分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。根据Lambert-Beer 定律:A=εbc,(A 为吸光度,ε 为摩尔吸光系数,为液池厚度,c 为溶液浓度)可以对溶液进行定量分析。你可以用紫外可见分光光度计测定定三种农药的波长在某溶液中的最大、最小吸收波长。配制溶液-在光谱检测项下进行-调整检测光谱范围及速度--扫描光谱图--吸光度最大处对应波长为最大吸收波长,吸光度最小处对应的波长为最小吸收波长。狭缝是指由一对隔板在光通路上形成的缝隙,用来调节入射单色光的纯度和强度,也直接影响分辩力。出射狭缝的宽度通常有两种表示方法:一为狭缝的实际宽度,以毫米(mm)表示,另一种为光谱频带宽度,即指由出射狭缝射出光束的光谱宽度,以毫微米 nm 表示。例如,出射狭缝的宽度是6nm,并不是说出射狭缝的宽度是6nm,而是指由此狭缝射出的光具有6nm的光谱带宽。纯粹的单色光只是一种理想情况,分光光度计所能得到的“单色光",实际上只是具有一定波长范围的谱带,狭缝越宽,所包括的波长范围也愈宽。 对单色光纯度来说,狭缝是愈窄愈好,但光的强度也就越弱,因此狭缝不能无限制地小,狭缝的最小宽度取决于检测器能准确地进行测量的最小光能量。目前达到的最小宽度为0.1nm。(一)使用的吸收池必须洁净,并注意配对使用。量瓶、移液管均应校正、洗净后使用。(二)取吸收池时,手指应拿毛玻璃面的两侧,装盛样品以池体的4/5为度,使用挥发性溶液时应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净,晾干防 尘保存。
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第1个回答  2021-04-13