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碱裂解法中三种溶液体积比
SDS
碱裂解法
制备质粒DNA的具体操作步骤是怎么样的?那位大侠给力点,帮...
答:
2.悬浮菌液。用200/250ul
碱
提Ⅰ液(确定已加入RNAse)悬浮沉淀,可在振荡器上振荡悬浮。目的是制成均一菌液。3.蛋白质变性。加入同Ⅰ液等
体积
Ⅱ液,轻柔颠倒6~8次。动作一定要轻柔,以免扯断质粒。4.中和SDS变性作用,沉淀蛋白质及基因组DNA。加入Ⅲ液,体积为Ⅰ
液的
1.2倍。加入后立即上下颠倒6...
碱裂解法中
哪些步骤或者试剂帮助核酸的沉淀
答:
溶液1:葡萄糖 50 mmol/L,EDTA 100 mmol/L,Tris-Cl 25 mmol/L,溶菌酶5mg/ml,pH 8.0
溶液2:NaOH 0.2 mol/L,SDS 1 溶液3:5 mol/L KAc 60 ml,冰乙酸 11.5 ml,重蒸水 28.5 ml 其中溶液1作用主要是悬浮菌体,溶液2作用是裂解菌体,释放胞内物质,溶液3是沉淀染色体DNA ...
等物质
的
量浓度的kcl,MgCl2,AlCl3
三种溶液
,现欲完全沉淀的其中的氯离子...
答:
体积比
为3:1:1/3
SDS
碱裂解法
提取质粒DNA
中溶液
1
的
成分及作用是什么?
答:
溶液
Ⅰ 50mM 葡萄糖 / 10mM EDTA / 25mM Tris-HCl,pH=8.0 葡萄糖增稠,使悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部;EDTA 抑制DNase的活性。这一步溶液中还可以加入RNase,不受EDTA影响,并且可以在后续步骤中被除去 溶液Ⅱ 0.2M NaOH / 1% SDS 破细胞的主要是碱,而不是SDS,所以才叫
碱
...
...离子完全沉淀,若使用浓度相同
的
硝酸银
溶液体积比
3:2...
答:
使用浓度相同的硝酸银溶液体积比3:2:1
,说明NaCl、MgCl2、AlCl3溶液中的Cl-之比 = 3:2:1 因为NaCl含有1个Cl-,MgCl2含有2个Cl-,AlCl3含有3个Cl- 所以三种溶液体积比 = (3/1):(2/2):(1/3)= 9:3:1
.../L的NaCl、 MgCl2和AlCl3
三种溶液
,当
溶液的体积比
为
答:
1. 为简单计,设NaCl、 MgCl2和AlCl3
三种溶液体积
分别为3, 2, 1L 1mol NaCl、 MgCl2和AlCl3分别电离出1, 2, 3 mol Cl- NaCl溶液中Cl-的物质的量: 0.1*3*1 = 0.3 mol MgCl2 溶液中Cl-的物质的量: 0.1*2*2 = 0.4 mol AlCl3溶液中Cl-的物质的量: 0.1*1*3 = 0.3 mol ...
碱裂解法
原理
答:
为了方便理解,这里罗列一下
碱法
质粒抽提用到
三种溶液
:溶液I,50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA,pH 8.0;溶液II,0.2 N NaOH / 1% SDS;溶液III,3 M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。 让我们先来看看溶液I的作用。任何生物化学反应,首先要控制好溶液的pH,因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液,是再...
同浓度
的三种溶液
中硫酸钠硫酸镁硫酸铝其
体积比
为3:2:1则硫酸根浓度之...
答:
B. 3:1 Na2SO4 ~ SO4 2- 物质的量浓度n,
体积
为V1 n n Al2(SO4)3 ~ 3SO4 2- 物质的量浓度n,体积为V2 n 3n n*V1 = 3n*V2 V1:V2 = 3:1
碱裂解法
原理
答:
后者被十二烷基硫酸盐包盖。当用K+取代Na+时,复合物会从
溶液
中有效地沉淀下来,离心除去变性剂后,就可以从上清中回收复性的质粒DNA。在SDS存在的条件下,
碱
水解是一项非常灵活的技术,它对E. coli的所有菌株都适用,并且其细菌培养物
的体积
可以从1-500mL以上。
分子实验查漏补缺系列:SDS
碱裂解法
制备质粒DNA
答:
尤其是在做质粒中抽或者大抽时这个问题很有可能出现,这个时候可通过用预冷的STE(离心用菌
液体积的
0.25倍)重悬细菌沉淀并离心来解决。c) 用100μL预冷
的碱裂解
液I重悬细菌沉淀,可以将两个微量离心管的管底互相接触同时涡旋振荡,这样可以提高细菌沉淀重悬的速度和效率,菌体一定要悬浮均匀,不能...
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