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细菌双杂交原理
做
细菌双杂交
时为什么要用共转化呢?共转的效率好低啊。可否先把诱饵质粒...
答:
如果两种质粒同时转入
细菌
效率低的话,可以分两步转化:先转化一种质粒,然后把转化该质粒的细菌做成感受态,再转入另一种质粒,这样的效率会高很多。转化效率低的一个原因是,制备感受态时细菌超过生长对数期了,变老了,这样对转化效率有很大的影响,尤其是在做
双杂交
的实验。
细菌的蛋白都可以用
细菌双杂交
来做吗
答:
细菌双杂交系统是新近建立的一种研究蛋白质间相互作用的方法
。应用细菌双杂交系统可以研究环境因子对固氮调节蛋白NifL和NifA相互作用的影响。但实验结果中发现有假阳性的干扰。对照组大肠杆菌一种融合蛋白的质粒,也可导致菌株β-半乳糖苷酶活性的上升或生长在MacConkey/麦芽糖平板上菌落呈浅红色的假阳性结...
试述
细菌
种属鉴定的常用分子生物学方法。
答:
变性rRNA与变性DNA混合时,rRNA与其互补的DNA链形成
杂交双
链,rRNA分子与异源DNA杂交时,也能在其同源区形成互补双链,这种杂交双链的稳定性与其同源性成正相关,适于
细菌
属及属上水平的分类研究。现最常用的是硝酸纤维膜结合法。②165rRNA序列测定。rRNA分子具有高度保守性,在所有的细胞生物中都存在,在...
请问一下菌种鉴定的方法和实验步骤
答:
*
DNA 杂交法的基本原理是用 DNA 解链的可逆性和碱基配对的专一性,将不同来源的 DNA 在体外加热解链
,并在合适的条件下,使互补的碱基重新配对结合成双链 DNA ,然后根据能生成双链的情况,检测杂合百分数。如果两条单链 DNA 的碱基顺序全部相同,则它们能生成完整的双链,即杂合率为 100% 。如果两条单链 DNA ...
酵母
双杂交
,营养缺陷培养基长出菌落,但提质粒,没有
答:
在
双杂交
鉴定过程中要经过两次转化,这个工作量是相当大的,特别是寻找新的作用蛋白质的时候尤其如此。而且,酵母细胞的转化效率比
细菌
要低约4个数量级。因此转化步骤就成为双杂交技术的瓶颈。Bendixen等人通过酵母接合型的引用,避免了两次转化操作,同时又提高了双杂交的效率。在酵母的有性生殖过程中涉及...
DNA分子
杂交
技术是什么?
答:
由于同位素被检出的灵敏度高,即使两种生物DNA分子之间形成百万分之一的双链区,也能够被检出。DNA分子
杂交
的意义 :分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,
细菌
与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;...
仅分子生物学阳性病人分类怎么写?
答:
1、酵母
双杂交
系统原理不同转录激活因子的DB和AD形成的杂合蛋白仍然具有正常的激活转录的功能 ,酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白-蛋白的相互作用2、酵母单
杂交原理
将已知的顺式作用元件构建到最基本启动子(Pmin)上游,把报告基因连接到Pmin下游。将待测转录因子的cDNA与酵母转录激活结构域(AD...
分子
杂交
的分子杂交方式
答:
固相膜核酸分子
杂交
(Colony in situ hybridization)将
细菌
从培养平板转移到硝酸纤维素滤膜上,然后将滤膜上的菌落裂菌以释出DNA,再烘干固定DNA于膜上,与32P标记的探针杂交,放射自显影检测菌落杂交信号,并与平板上的菌落对位。 (Dot blotting)该方法是将被检标本点到膜上,烘烤固定。这种方法耗时...
高中生物DNA探针含义是什么?运行
原理
?
答:
回答:DNA探针是最常用的核酸探针,指长度在几百碱基对以上的双链DNA或单链DNA探针。现已获得DNA探针数量很多,有
细菌
、病毒、原虫、真菌、动物和人类细胞DNA探针。这类探针多为某一基因的全部或部分序列,或某一非编码序列。这些DNA片段须是特异的,如细菌的毒力因子基因探针和人类Alu探针。这些DNA探针的获...
最近做酵母
双杂交
,筛选到12个阳性克隆,编码同一个基因,但是翻译不通...
答:
把探针 DNA和硝酸纤维滤膜上的菌落或噬菌体分别进行变性处理,然后进行分子
杂交
。再将 X光底片覆盖在经过处理的滤膜上以进行放射自显影。在培养皿上找出和 X光底片上的黑点相对应的菌落或噬菌斑,这些菌落或噬菌体中便包含着所需要的基因。经过扩增便能得到大量的
细菌
或噬菌体,从中可以分离出所需基因的DNA片段。
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