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western配胶aps
在
western配胶
中
APS
的作用
答:
AP 全称过硫酸铵,在制胶过程中起到催化剂的作用.
Western
Blot基本原理及步骤
答:
2、
配胶
时,用吹风机将胶板吹干后,一定要等胶板完全冷却后,才能倒胶,否则热量会使得胶迅速凝结而导致花胶。倒分离胶时,不可倒得过满,要保证梳子插在积层胶里而不会触碰到分离胶。液封是用200μl或100μl的移液枪较为合适,且边移动枪边缓缓打入乙醇,切不可用大量程的枪,会因为乙醇注入过...
请教
Western
Blot 中
配胶
的问题
答:
Western
Blot 中
配胶
的问题主要是有时候配的胶等了很久也不会凝,而有的却凝的非常快 在配胶中最关键的是过硫酸铵(
APS
)和四甲基乙二胺(TEMED),过硫酸铵一定要新鲜配制,有时候也配成溶液分装好冻负20度保存,但是最好不要超过2周 四甲基乙二胺加入之后凝胶就会非常快,所以一定是要迅速灌胶...
请教
Western
Blot 中
配胶
的问题
答:
western
blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kda的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kda的目的蛋白 而因为western blot的膜应该是完全覆盖sds page的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位置偏上活偏下 所以wes...
western
-blot胶不凝固是什么原因啊
答:
1,复查一遍浓缩
胶
,分离胶各buffer的组分是否配制有误,特别是pH,现在气温上升,原来冬天配制的溶液的pH和现在可能会相差很多,建议复查,如果pH不对,重新配过。一般情况下,对于pH有要求的溶液,季节更换的时候,基本要重新配过的。原来以贮存液形式存在的溶液,在稀释用作工作液的时候,也要特别注意...
10%
APS
怎么配?
答:
vvvvvvvvvvv
聚丙烯酰胺与聚丙烯酰胺凝胶溶液相比有什么不同
答:
APS
应该现配聚丙烯酰胺凝胶溶液: 分离胶12.5% ,PH8.8 5ml 10ml 15ml 超纯水 1.5ml 3.0 ml 4.5 ml 非离子聚丙烯酰胺太慢则说明两种试剂用量不够或者系统实际不纯或失效。4)混合搅拌速度太快产生 可是由于经费限制或者偷懒的原因,国内的不少人做
Western
Blot。Zetag汽巴除铁器精化高分子絮凝剂...
SDS-PAGE原理
答:
1.
配胶
,有分离胶和浓缩胶之分,胶浓度随你蛋白的大小变化而变化,一般12%,一般需要两个小时,需要提前准备。短期可以充水放置于4℃冰箱。2.将蛋白加入5X的SDS-loading, 100℃加热10min,以充分变性蛋白。3.上样,一般10μL。4.浓缩胶一般80V 30min 进入分离胶后可140V 30min。5.结束后可...
平时实验没有做成功|我成功了做实验
答:
11.
配胶
最好现用现配,先配下层胶(分离胶),后配上层胶(浓缩胶或积层胶),而且在临灌胶前加
APS
并迅速混匀,即用移液枪抽吸与注入1-2次即可。(管家哥提醒,有条件最好现配现用,如果是配好板子的,也最好尽快在2天内使用,同时保鲜膜注意密封好。) 12. 跑蛋白page的时候,一开始用加样针,太麻烦,发现用20...
temed打翻了怎么办
答:
因为这家公司是做抗体的,
Western
Blot就成了必不可少的质检环节。所以,公司雇了好多像我一样的实验员,天天在重复这些劳动。过了不久,我就对这份工作十分失望:天天
配胶
跑Western Blot,这也太TM无聊了吧!于是我开始混日子的生活,白天玩手机,晚上打游戏,做实验也是应付了事。现在回想起来,如果...
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