过氧化氢含量的测定
一、目的要求
学习果蔬组织中过氧化氢含量的测定原理和方法。
二、基本原理
果蔬体内积累的H2O2可以直接或间接地导致细胞膜脂质过氧化损害，加速细胞的衰老和解体。但是，在受到病原菌侵染或受到不良环境胁迫时，果蔬体内迅速积累的H2O2参与果蔬抗病性和抗逆性启动和诱导过程。因此，了解果蔬组织中H2O2的代谢具有十分重要的意义。
H2O2与四氯化钛（或硫酸钛）反应生成的过氧化物-钛复合物黄色沉淀，溶解于H2SO4后，可在波长412 nm处比色测定。在一定范围内，其颜色深浅与H2O2浓度呈线性关系。
三、材料、仪器及试剂
（一）材料
苹果、番茄、芒果、桃等。
（二）仪器及用具
研钵、移液器、容量瓶（100 mL）、离心管、试管、高速冷冻离心机、分光光度计、通风橱。
（三）试剂
1．-20℃预冷丙酮
2．浓氨水
3．2 mol/L硫酸取10 mL浓硫酸，稀释到90 mL。
4．10%（v/v）四氯化钛-盐酸溶液在通风厨中，将10 mL四氯化钛，缓慢加入到90 mL盐酸中。轻轻地在操作台上平摇，使四氯化钛充分溶解。将试剂转入到棕色瓶中，密闭、4℃保存。
5．100 μmol/L H2O2-丙酮试剂取57 μL 30%分析纯H2O2，溶于重蒸水中，稀释，定容至100 mL，得10 mmol/L H2O2溶液。取1 mL该溶液，溶于丙酮中，并用丙酮定容至100 mL，即为100 μmol/L H2O2-丙酮试剂。
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