紫外可见分光光度计的用法

Question

如题所述

Answer 1

752紫外可见分光光度计
仪器的工作原理
分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的

吸收效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的

吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减

弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理—一比耳定律。
τ=I/Io
log I/Io=KCL
A= KCL
从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时．透过
的光是根据溶液的浓度而变化的，752紫外可见分光光度计的基本原理是根
据上述物理光学现象而设计的。
仪器的安装、使用
安装

1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查，电源电压是否正常，接

地线是否牢固可靠，在得到确认后方和接通电源使用。

2 仪器经过运输和搬运等原因，会影响波长准确度，应进行仪器调校后使用。

使用：仪器使用前需开机预热30min。

本仪器键盘共有4个键，分别为； 1 A /τ/C/F

1SD

2 ▽／0％

3∆／100％

4 A /τ/C/F键：每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。

A——吸光度（Absorbance）

T——透射比（Trans）

C——浓度（conc）

F——斜率（Factor）

(2)F值 通过按键输入（后面介绍如何设置）

5SD键：该键具有2个功能

a)用于RS232串行口和计算机传输数据（单向传输数据，仪器发向计算

机）。

b)当处于F状态时，具有确认的功能，即确认当前的F值，并自动转到C，

计算当前的C值（C=F*A）。

6 ▽／0％键：该键具有2个功能

a）调零；只有在τ状态时有效，打开样品室盖，按键后应显示0.000。

b）下降键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动减1，如果按住本

键不放，目动减1会加快速度；如果F值为0后，再按键它会自动变为1999。

而按键开始自动减1。

7 ∆／100％键；该键具有2个功能

a）只有在A、τ状态时有效，关闭样品室盖，按键后应显示0.000、100.0。

b）上升键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动加1，如果按住本

键不放，自动加1会加快速度，如果F值为1999后，再按键它会自动

变为0，再往键开始自动加l。

例如：设置斜率为1500。

方法一

T）按 A／τ／C／F键切换到 F状态。

b）如果当前F值为1000，则按∆／100%键，直到F值为1500。

C）再按 SD键，表示当前的 F值为 1500，然后自动回到 C状态，假如所

测的 A值为 0．234，则此时显示 C值为 0351。

方法二

a）按A／τ／C／F键切换到F状态。

b）如果当前的 F值为 1000，则按∆／100%键，直到F值为 1500、再按 A／τ／C／F键切换到C状态，假如所测的A值为0.224，则此时显示C值为0351。

Answer 2

可见分光光度计的波长适用范围一般从350nm左右开始到1100nm左右，紫外可见分光光度计的波长适用范围一般从190nm到1100nm。从这点区别上看就是波长的适用范围不一样，紫外可见分光光度计多了从190到350nm左右这段波长。正式由于这段紫外光的区别，就决定了他们的仪器结构部件有一些不同了，他们的不同之处主要在于以下几个地方：
1、光源不同：可见分光光度计的光源一般只用钨灯，而紫外可见分光光度计是用钨灯+氘灯两个光源，同时还多了这两个光源灯的切换部件。这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段，氘灯主要在紫外端。也正是因为光源的不一样，紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了。
2、光学器件的不同：由于玻璃能吸收紫外波，而对可见到近红外端有比较好的透过性，所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃，而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件，一般使用石英光学部件。同时由于这个原因，在比色皿的选择上也就有不同了，可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿，而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了。
3、接收器的不同：由于紫外可见分光光度计多了紫外波，所以在接收器的选择上也就不一样了。多了对紫外波的灵敏响应功能，这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了。

Answer 3

Answer 4

主要是应用分子中的某些基团吸收了紫外可辐射光后，发生电子能级跃迁而产生的吸收光谱。是带状光谱，反应分子中某些基团的信息，可以用标准光谱图再结合其他手段，进行定性分析。我们实验室中的仪器是在科邦实验室入手的，主要用于测物质的光度以求得物质的浓度。