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细胞计数仪测细胞凋亡的方法
如何用流式
细胞仪检测细胞凋亡
?
答:
细胞凋亡的检测方法众多,
流式细胞仪检测凋亡
,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。为您介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是caspase家族激...
用流式细胞仪检测细胞凋亡
答:
细胞凋亡(apoptosis)(定量检测DNA降解、线粒体膜电位、通透性变化)细胞存活能力 监测细胞电通透性 氧爆作用(oxidative burst)研究癌细胞中的多重耐药性(multi-drug resistance, MDR)谷胱甘肽 各种组合(DNA/表面抗原等等)这个列表非常长,而且在不断地扩展。[编辑]
流式细胞仪
(flow cytometer)流式细胞仪...
Annexin Ⅴ-FITC/PI能否用于
测定细胞
周期
答:
测细胞
周期的大致步骤如下:1. 收集1 x106个细胞,1500rpm离心5 min,弃上清。同样离心条件下,用4℃预冷的PBS洗细胞两次。2. 完全去除上清,加入-20℃预冷的70%乙醇1 ml,立即充分混匀,于4℃固定过夜或-20℃长期固定(可保存数周)。3. 细胞染色 1500rpm离心5 min,弃上清,以1 ...
检测细胞凋亡
AV-PI双染的具体步骤是怎样的?注意事项有哪些?
答:
除了上述的操作步骤,还有一个必须注意的,就是对照。阴性对照,阳性对照,还有调节通道的,只加PI,只加AV,这些都要设计好,要不测出来的值不可信。细胞接种后,每日
计数细胞
数,连续观察7-10日,在对数坐标纸上绘制细胞生长曲线,确定曲线基本呈水平的部分即为指数生长期(一般在2-6日)。 各种细...
什么
方法
最快检验出死亡
细胞的数目
答:
TUNEL检测。基因组DNA断裂时,暴露的3''-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,
从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测
,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。
hoechst 和tunel法
检测细胞凋亡的
区别
答:
细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,
从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测
。
T
细胞
增殖实验和细胞毒实验各有哪些常用
方法
并简述其原理和特点?_百度...
答:
若待检效应细胞能杀伤靶细胞,则51Cr从靶细胞内释出,靶细胞被破坏越多,51Cr释放越多,用γ
计数仪测定
释出的51Cr放射活性,可计算出待检效应
细胞的
杀伤活性。后者是根据靶细胞被效应细胞杀伤后,可发生细胞凋亡、DNA断裂的原理,用琼脂糖电泳等
方法测定细胞凋亡
,用于效应细胞杀伤活性的判断。
细胞
周期
测定
实验
答:
首先,我们从
细胞计数
法说起,这种
方法
旨在
测定细胞
分裂指数,即分裂细胞在总细胞中的比例,直接反映细胞增殖的速度。所需材料包括活细胞、胰酶、甲醇等试剂,以及CO2培养箱和显微镜等精密
仪器
。操作过程中,需轻柔处理以防止细胞脱落,消化细胞后培养48小时,再通过固定、染色和显微镜观察,计算分裂指数。接...
判断
细胞
死活
的方法
答:
2 仪器分析法 可采用微电极技术(利用死活细胞膜两侧电位的差异)、全自动分析细胞记数仪和
流式细胞仪
等,可对细胞的死活进行精确的批量检测。德国INNOVATIS出产的全自动Cedex细胞存活率/细胞计数仪/细胞分析仪是世界上第一台高分辨率、高清晰度扫描(专利)细胞分析仪,具有全自动台盼蓝染色、显微CCD成象...
一个高等生物学问题。
答:
(1)
细胞
收集:常规离心收集1-5X106细胞,注意因
凋亡
而悬浮的细胞和贴壁的细胞要同时收集。弃上清液,PBS洗1次。加入0.5m1细胞裂解液,在50℃中放置3-5h,以裂解细胞。(2)在细胞裂解液中加入等体积饱和苯酚抽提,6 000r/min离心5rain吸取上清液,再依次用等体积酚:氯仿(1:1),氯仿:异戊醇(24...
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